專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學（包括寄生蟲學）106 年第 57 題單選題
下列何種分子檢驗技術不需使用探針？
A等位基因特異性寡苷核酸（Allele-specific oligonucleotide, ASO）
B原位螢光雜交（Fluorescence in situ hybridization, FISH）
C即時聚合酶連鎖反應（Real-time PCR）TaqMan系統
D單股結構多型性（Single-strand conformation polymorphism, SSCP）正確答案
D正確答案
SSCP 利用單股 DNA 構形差異於電泳上分離，不需探針；A、B、C 均需要探針偵測。
為什麼答案是 D
SSCP 是把 PCR 產物變性成單股後，利用單股 DNA 因序列差異形成不同二級構形、在非變性電泳中遷移率不同來偵測突變，全程不需探針，只需電泳與染色。
載入中…
完整詳解
Pro · 無限重點 SSCP 利用單股 DNA 構形差異於電泳上分離，不需探針；A、B、C 均需要探針偵測。
看到「電泳分離構形」想到 SSCP，沒探針；其他三項只要看到 ASO/FISH/TaqMan 都跟探針綁定。
逐選項分析
A✕
ASO 本身就是「等位基因特異性寡核苷酸探針」，設計成可區分 1 個鹼基差異的短探針，與目標 DNA 雜交來辨識點突變。名字裡就有「探針」概念。
B✕
FISH 必須使用螢光標記的核酸探針與染色體或細胞內目標序列雜交，再以螢光顯微鏡觀察。探針是 FISH 的核心元素，無探針就無法定位訊號。
C✕
TaqMan 系統的核心就是水解探針（5' 報導螢光、3' 淬熄基團），藉 Taq 聚合酶的 5'→3' 外切活性裂解探針釋放螢光訊號。無探針即非 TaqMan。
D✓ 正確
SSCP 是把 PCR 產物變性成單股後，利用單股 DNA 因序列差異形成不同二級構形、在非變性電泳中遷移率不同來偵測突變，全程不需探針，只需電泳與染色。
常見分子檢驗技術是否需要探針
| 技術 | 原理 | 是否需探針 | 偵測方式 |
|---|
| ASO | 短寡核苷酸與目標雜交辨識點突變 | 需要 | 雜交訊號 |
| FISH | 螢光探針與染色體雜交 | 需要 | 螢光顯微鏡 |
| Real-time PCR (TaqMan) | 水解探針釋放螢光 | 需要 | 螢光即時監測 |
| SSCP | 單股 DNA 構形差異電泳 | 不需要 | 電泳遷移率 |
| RFLP | 限制酶切割後電泳 | 不需要 | 片段大小 |
考生易被「Real-time PCR」字面誤導，以為都不需探針；其實 TaqMan 系統正是以探針為核心，與 SYBR Green（嵌入染料、無探針）不同。SSCP 才是純粹靠電泳偵測構形變化的非探針法。
醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學（包括寄生蟲學） 相關題目
