專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學（包括寄生蟲學）113 年第 65 題單選題
關於 nucleic acid sequence-based amplification（NASBA）的敘述，下列何者最不適當？
A此技術已被廣泛應用於RNA病毒與細菌的偵測
B可以加入寡核苷酸探針的信號分子（molecular beacon），再藉由反應後所產生之螢光訊號的強度定量RNA，此稱為 real-time NASBA
C若檢體中有少量雙股DNA存在，會有偽陽性的結果，所以反應時需要加入DNase去除DNA正確答案
Dreal-time NASBA的擴增與檢測反應，全在同一密閉管內進行，可以降低核酸污染發生的可能性
C正確答案
NASBA是等溫RNA擴增技術，專一擴增RNA不需DNase去DNA，故C敘述最不適當。
為什麼答案是 C
NASBA是等溫擴增且專一以RNA為模板（透過反轉錄酶、RNase H、T7 RNA聚合酶運作），對雙股DNA擴增效率極低，並非靠加DNase來避免偽陽性，故此敘述最不適當，為正解。
考點：NASBA應用考點：real-time NASBA考點：等溫RNA專一性考點：密閉管降污染
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