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專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)113 年第 49 題單選題考點:MSP高靈敏考點:南方墨點低靈敏

下列那種甲基化分析方法的靈敏度最低?

A甲基化專一性PCR反應
B以南方墨點法分析經同型異質鑑識酶(isoschizomer)切割後的片段正確答案
C重亞硫酸鹽定序法
DMethyLight分析
答案與詳解
B
正確答案
南方墨點法需大量DNA、不經PCR放大訊號,是四種甲基化分析中靈敏度最低的方法。

逐選項解析

A甲基化專一性PCR反應MSP高靈敏✕ 錯誤
甲基化專一性PCR(MSP)先以重亞硫酸鹽處理,再用專一性引子做PCR放大,因含PCR放大步驟,僅需微量DNA即可偵測,靈敏度高。
B以南方墨點法分析經同型異質鑑識酶(isoschizomer)切割後的片段南方墨點低靈敏✓ 正確
以同型異質鑑識酶切割後做南方墨點分析,需要相對大量的基因組DNA,且無PCR放大訊號步驟,靠雜交呈色,因此靈敏度最低,這是本題答案。
C重亞硫酸鹽定序法✕ 錯誤
DMethyLight分析✕ 錯誤

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