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專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)111 年第 51 題單選題考點:範圍誇大考點:聚合酶必要

針對單分子即時定序(single molecule real-time sequencing, SMRT)的敘述,下列何者最正確?

A單分子即時定序是所有高通量基因定序的設計原理
B單分子即時定序無須進行核糖核酸擴增,因此不需要使用DNA聚合酶
C相較於二代定序產出的讀長(reads),單分子即時定序的讀長較長正確答案
D相較於二代定序,單分子即時定序較能準確測定基因產物的豐度(abundance)
答案與詳解
C
正確答案
SMRT 屬第三代定序,最大優勢就是「超長讀長」(long reads),可達數十 kb,能解決重複序列與結構變異難題。

逐選項解析

A單分子即時定序是所有高通量基因定序的設計原理範圍誇大✕ 易錯陷阱
高通量定序原理多元,二代定序(如 Illumina)靠橋式 PCR 與合成定序(SBS),並非以單分子即時定序為共同設計原理。把 SMRT 講成「所有」高通量定序的原理是過度概括。
B單分子即時定序無須進行核糖核酸擴增,因此不需要使用DNA聚合酶聚合酶必要✕ 易錯陷阱
SMRT 是即時觀測 DNA 聚合酶在 ZMW 孔中合成新股、加入螢光標記核苷酸的過程,因此「絕對需要」DNA 聚合酶。且擴增是 DNA 而非核糖核酸(RNA),敘述觀念雙重錯誤。
C相較於二代定序產出的讀長(reads),單分子即時定序的讀長較長✓ 正確
D相較於二代定序,單分子即時定序較能準確測定基因產物的豐度(abundance)✕ 錯誤

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