專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)107 年第 52 題單選題考點:甲基化保留性考點:Bisulfite 標準轉換
甲基化的DNA序列5'-ATCTAAmCG-3' 經bisulfite處理,PCR增幅,由pyrosequencing所得結果為何?
A5'-ATCTAATG-3'
B5'-ATTTAACG-3'正確答案
C5'-ATCTAACG-3'
D5'-ATTTAATG-3'
B正確答案
Bisulfite 處理會把未甲基化 C 轉成 U(PCR 後變 T),甲基化 C 則不變,故 mC 仍讀為 C。
逐選項解析
A5'-ATCTAATG-3'甲基化保留性✕ 錯誤
把 mC 也變成 T 了,方向錯誤。甲基化的 C 才是「抗 bisulfite」會保留為 C 的那個。
B5'-ATTTAACG-3'Bisulfite 標準轉換✓ 正確
原序列 5'-ATCTAAmCG-3':第 3 位 C 未甲基化 → 轉為 T;第 7 位 mC 已甲基化 → 保留為 C。結果為 5'-ATTTAACG-3',正確。
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