專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學（包括寄生蟲學）111 年第 69 題單選題
Spacer oligotyping（spoligotyping）是常用於結核桿菌（Mycobacterium tuberculosis, MTB）分型的分子檢驗方法，關於spoligotyping的敘述，下列何者最不適當？
AMTB的基因組中，具有多個序列相同且長度為36個鹼基對的區域，稱之為direct repeat（DR）區域
BMTB的基因組中的direct repeat（DR）區域是由基因序列具高度相似性的spacer sequence隔開正確答案
Cspoligotyping是以direct repeat（DR）區域設計PCR引子，並針對spacer sequence設計專一性探針
Dspoligotyping需要進行PCR擴增與雜交反應
B正確答案
Spoligotyping靠DR區與其間「不同」的spacer序列分型；B說spacer高度相似是錯的。
為什麼答案是 B
DR重複序列之間夾的是spacer sequence，但這些spacer彼此「序列各異、非高度相似」，正因spacer的有無與差異才能用來區分不同菌株。說spacer高度相似是錯誤敘述，故為本題答案。
載入中…
完整詳解
Pro · 無限重點 Spoligotyping靠DR區與其間「不同」的spacer序列分型；B說spacer高度相似是錯的。
spacer之所以能分型，是因為各菌株間spacer『有無/差異』，若高度相似就無法區分→B錯。
逐選項分析
A✕
MTB的DR locus確實由多個保守、長度約36 bp的direct repeat（DR）重複序列組成，是spoligotyping的固定錨點。此敘述正確。
B✓ 正確
DR重複序列之間夾的是spacer sequence，但這些spacer彼此「序列各異、非高度相似」，正因spacer的有無與差異才能用來區分不同菌株。說spacer高度相似是錯誤敘述，故為本題答案。
C✕
spoligotyping以保守的DR序列設計PCR引子擴增整段DR locus，再用針對各個spacer的專一性探針進行雜交，判讀spacer有無。此操作描述正確。
D✕
spoligotyping流程包含PCR擴增DR區域，再與固定於膜上的spacer探針進行反向雜交（reverse line blot），確實需PCR與雜交兩步驟。此敘述正確。
Spoligotyping核心概念
| 元件 | 特性 | 用途 |
|---|
| Direct Repeat (DR) | 36 bp、保守、重複 | 設計PCR引子的錨點 |
| Spacer sequence | 各菌株間差異大、不相似 | 分型判讀依據 |
| PCR + 雜交 | 擴增DR區後反向雜交 | 偵測spacer有無→指紋圖譜 |
本題把『DR重複序列高度相似』與『spacer序列差異』的特性對調。考點在於：DR才是保守相似的部分，spacer彼此各異，正是這種差異性讓spoligotyping能區分菌株。若spacer也高度相似就無分型意義。
醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學（包括寄生蟲學） 相關題目
