專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學（包括寄生蟲學）111 年第 63 題單選題
關於分子檢驗實驗室的品質保證作法，下列何者最不適當？
A試劑加至檢體的順序為陰性品管檢體、病人檢體、陽性品管檢體，以避免陰性品管檢體以及病人檢體被污染正確答案
B使用有濾網（filter）的微量吸管尖（pipet tip），防止檢體或核酸污染微量吸管
C每天使用10％的漂白水擦拭工作檯面，破壞殘留的核酸
D當有核酸污染疑慮時，使用棉棒沾取無菌水，對工作區域表面進行wipe test
A正確答案
分子檢驗防核酸污染的鐵則是「先加試劑（master mix），再加核酸模板」，且加模板順序應為陰性品管→病人檢體→陽性品管。A選項說「試劑加至檢體」（方向相反，把試劑加進已有檢體的管），且把陽性品管放最後並無法消除其高濃度核酸carryover風險，故為最不適當。
為什麼答案是 A
最不適當。理由有二：(1)操作方向錯誤——標準作法是先分裝好試劑（master mix）於各反應管，再「將核酸模板加入試劑」；A卻說「試劑加至檢體」，把試劑加進已含檢體的管中，違反先鋪試劑的原則。(2)順序的防污染效益有限——縱使按陰性→病人→陽性加入，陽性品管屬高濃度核酸，最易造成carryover污染，真正關鍵是要『物理分區、最後且分開操作陽性品管』，光靠加樣順序並不能有效避免污染。故A的敘述邏輯與防污染目的不符。
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完整詳解
Pro · 無限重點 分子檢驗防核酸污染的鐵則是「先加試劑（master mix），再加核酸模板」，且加模板順序應為陰性品管→病人檢體→陽性品管。A選項說「試劑加至檢體」（方向相反，把試劑加進已有檢體的管），且把陽性品管放最後並無法消除其高濃度核酸carryover風險，故為最不適當。
看到「試劑加至檢體」就要警覺——正確是「檢體（核酸）加至試劑」或先鋪好master mix。B/C/D都是教科書標準防污染作法，剩下A即為答案。
逐選項分析
A✓ 正確
最不適當。理由有二：(1)操作方向錯誤——標準作法是先分裝好試劑（master mix）於各反應管，再「將核酸模板加入試劑」；A卻說「試劑加至檢體」，把試劑加進已含檢體的管中，違反先鋪試劑的原則。(2)順序的防污染效益有限——縱使按陰性→病人→陽性加入，陽性品管屬高濃度核酸，最易造成carryover污染，真正關鍵是要『物理分區、最後且分開操作陽性品管』，光靠加樣順序並不能有效避免污染。故A的敘述邏輯與防污染目的不符。
B✕
正確作法。有濾網（filter／aerosol-resistant）的吸管尖能阻擋氣溶膠核酸進入吸管內部，防止吸管被污染後造成後續樣本交叉污染，是分子實驗室必備措施。
C✕
正確作法。10％漂白水（次氯酸鈉）可氧化降解殘留的DNA/RNA，破壞核酸結構，是每日清潔工作檯面、消除殘留核酸的標準方式。
D✕
正確作法。懷疑核酸污染時，以棉棒沾無菌水進行wipe test擦拭可疑表面，再以PCR檢測是否殘留目標核酸，是定位與監測環境污染源的標準方法。
分子實驗室防污染（anti-contamination）要點
| 措施 | 目的 | 頻率/時機 |
|---|
| 先加試劑再加模板核酸 | 避免試劑被污染、確保加樣方向正確 | 每次操作 |
| 陽性品管最後且分開操作 | 防高濃度核酸carryover | 每次操作 |
| 濾網吸管尖 | 防氣溶膠污染吸管 | 每次操作 |
| 10% 漂白水擦拭 | 降解殘留核酸 | 每日 |
| wipe test | 監測污染源 | 懷疑污染時 |
A以「陰性→病人→陽性」看似由乾淨到髒的合理順序誤導考生，但決定性問題在於：(1)敘述方向是「試劑加至檢體」，與標準的『先鋪試劑、後加模板』相反；(2)陽性品管屬高濃度核酸，單靠加樣順序無法消除其carryover污染風險，須以物理分區並最後分開操作。故A為最不適當。
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