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專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)111 年第 57 題單選題考點:先增幅後切割考點:AFLP(非本題)

關於聚合酶連鎖反應-限制酶片段長度多型性分析(PCR-RFLP)法,下列敘述何者正確?

A先對單一特定基因進行增幅,再使用限制酶對產物進行切割的方法正確答案
B染色體先進行限制酶切割後,以不同的adaptor DNA接合,再以引子結合adaptor DNA的部分進行增幅的方法
C針對隨機重複序列(tandem repeat sequence)進行增幅的方法
D進行多個隨機重複序列(tandem repeat sequence)增幅的分析法
答案與詳解
A
正確答案
PCR-RFLP 是先用 PCR 增幅特定基因,再用限制酶切割產物,依片段長度差異區分多型性。

逐選項解析

A先對單一特定基因進行增幅,再使用限制酶對產物進行切割的方法先增幅後切割✓ 正確
正確。PCR-RFLP 標準流程:先以引子對單一特定基因區段進行 PCR 增幅,取得大量產物後,再用特定限制酶切割,藉由切割後片段長度的差異(突變造成切位增減)來偵測基因多型性或點突變。
B染色體先進行限制酶切割後,以不同的adaptor DNA接合,再以引子結合adaptor DNA的部分進行增幅的方法AFLP(非本題)✕ 易錯陷阱
錯誤。此敘述描述的是 AFLP(擴增片段長度多型性):先限制酶切割基因組 DNA,接上 adaptor,再以結合 adaptor 的引子增幅。與 PCR-RFLP 的順序與原理不同,屬名詞偷換陷阱。
C針對隨機重複序列(tandem repeat sequence)進行增幅的方法✕ 錯誤
D進行多個隨機重複序列(tandem repeat sequence)增幅的分析法✕ 錯誤

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