專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學（包括寄生蟲學）111 年第 63 題單選題
【承上題前情】
下圖為以聚合酶連鎖反應檢測水泡液中腸病毒（enterovirus, EV）的電泳分析結果。關於此檢驗的結果判讀，下列何者最不適當？
承上題，檢體的檢測結果判讀何者正確？
A對照組3的檢測是多餘的，不需要執行
B檢體1是腸病毒陰性正確答案
C檢體2及檢體5是腸病毒陽性
D檢體3是腸病毒陰性
B正確答案
本題為巢式PCR（nested PCR）腸病毒檢測判讀，需同時看第一輪與第二輪結果，並正確理解各對照組與內部控制條帶的意義。
為什麼答案是 B
圖中S1（檢體1）在第一輪PCR僅出現196 bp的內部控制條帶，無347 bp泛腸病毒條帶；第二輪PCR（EVSP1/EVSP2）的S1欄位亦無260 bp條帶。內部控制條帶存在代表RNA萃取及PCR流程正常，因此S1為腸病毒真陰性，判讀為腸病毒陰性正確。
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完整詳解
Pro · 無限重點 本題為巢式PCR（nested PCR）腸病毒檢測判讀，需同時看第一輪與第二輪結果，並正確理解各對照組與內部控制條帶的意義。
先確認內部控制（196 bp）條帶存在代表RNA萃取/PCR正常；再看347 bp（第一輪泛腸病毒）與260 bp（第二輪特異性）條帶判斷陽性。
逐選項分析
A✕ 陷阱
對照組3（C3）在第一輪PCR中只出現196 bp的內部控制條帶，無347 bp條帶，是陰性對照組（negative control），用來確認無汙染，為必要的品質控制步驟，絕非多餘。對照組C1（347 bp+196 bp出現）為陽性對照，C2為空白對照，C3為陰性對照，三者缺一不可。
B✓ 正確
圖中S1（檢體1）在第一輪PCR僅出現196 bp的內部控制條帶，無347 bp泛腸病毒條帶；第二輪PCR（EVSP1/EVSP2）的S1欄位亦無260 bp條帶。內部控制條帶存在代表RNA萃取及PCR流程正常，因此S1為腸病毒真陰性，判讀為腸病毒陰性正確。
C✕ 陷阱
S2（檢體2）在第一輪PCR僅有196 bp內部控制條帶，無347 bp條帶，第二輪也無260 bp條帶，應為陰性。S5（檢體5）在第一輪有196 bp條帶，第二輪PCR出現260 bp條帶，S5確為陽性；但S2為陰性，故「S2及S5皆為陽性」敘述錯誤。
D✕ 陷阱
圖中S3（檢體3）在第一輪PCR出現196 bp內部控制條帶（隱約可見），第二輪PCR（EVSP1/EVSP2）的S3欄位出現明顯的260 bp條帶，代表特異性腸病毒序列被擴增，S3應判讀為腸病毒陽性，而非陰性。
各檢體/對照組條帶判讀總覽
| 編號 | 第一輪347bp | 第一輪196bp(IC) | 第二輪260bp | 判讀結論 |
|---|
| C1（陽性對照） | ＋ | ＋ | —（未做） | 陽性對照正常 |
| C2（空白對照） | — | — | —（未做） | 無汙染確認 |
| C3（陰性對照） | — | ＋ | —（未做） | 陰性對照正常 |
| S1（檢體1） | — | ＋ | — | 腸病毒陰性✓ |
| S2（檢體2） | — | ＋ | — | 腸病毒陰性 |
| S3（檢體3） | —/微弱 | ＋ | ＋ | 腸病毒陽性 |
| S4（檢體4） | — | ＋ | — | 腸病毒陰性 |
| S5（檢體5） | — | ＋ | ＋ | 腸病毒陽性 |
本題最大陷阱有二：①誤以為對照組C3多餘（實為必要的陰性對照，確保無汙染）；②誤以為S2出現內部控制條帶就是陽性——內部控制196 bp條帶只代表實驗流程正常，不代表腸病毒存在，必須看347 bp或260 bp特異性條帶才能判斷腸病毒陽性。
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