專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)111 年第 75 題單選題
循環核酸(Circulating nucleic acid)可以做為腫瘤核酸標誌檢驗的標的。下列有關循環核酸分離技術的敘述,何者正確?
AHeparin為適合的抗凝血劑
B循環核酸適合以分離高分子量核酸的技術取得
C血漿是腫瘤循環核酸標誌較佳的樣品來源正確答案
D適合以全血的方式做長期的檢體保存
C正確答案
循環核酸(cfDNA/ctDNA)多為短片段、低濃度,血漿是最佳檢體來源,需避用Heparin抗凝。
為什麼答案是 C
血漿(plasma)相較於血清(serum)較佳,因血清在凝血過程中會有白血球破裂釋放大量基因組DNA造成污染、稀釋ctDNA訊號。故腫瘤循環核酸標誌以血漿為較佳樣品來源,正解。
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完整詳解
Pro · 無限重點 循環核酸(cfDNA/ctDNA)多為短片段、低濃度,血漿是最佳檢體來源,需避用Heparin抗凝。
記住三原則:用血漿(非全血)、用EDTA抗凝(非Heparin)、循環核酸是「短片段」非高分子量。
逐選項分析
A✕ 陷阱
Heparin會抑制後續PCR反應,是分子檢驗的大忌,絕不適合作為循環核酸檢測的抗凝血劑。一般採用EDTA管,並建議使用cfDNA專用保存管以避免細胞溶解釋放基因組DNA。
B✕ 陷阱
循環核酸(cfDNA/ctDNA)多為凋亡或壞死細胞釋放的「短片段」核酸(約160-180 bp),並非高分子量核酸。應採用適合分離低分子量、短片段核酸的技術,而非高分子量萃取法。
C✓ 正確
血漿(plasma)相較於血清(serum)較佳,因血清在凝血過程中會有白血球破裂釋放大量基因組DNA造成污染、稀釋ctDNA訊號。故腫瘤循環核酸標誌以血漿為較佳樣品來源,正解。
D✕
全血長期保存會使血球細胞溶解、釋放大量基因組DNA污染循環核酸樣本,並改變cfDNA濃度比例。應盡快分離血漿並冷凍保存,不適合以全血方式長期保存檢體。
循環核酸(cfDNA/ctDNA)檢驗要點
| 項目 | 正確做法 | 錯誤做法 | 原因 |
|---|
| 抗凝劑 | EDTA / cfDNA專用管 | Heparin | Heparin抑制PCR |
| 檢體來源 | 血漿(plasma) | 全血、血清 | 減少基因組DNA污染 |
| 核酸特性 | 短片段(~160bp) | 高分子量萃取 | cfDNA多為短片段 |
| 保存方式 | 速分離後冷凍 | 全血久放 | 避免血球溶解污染 |
本題四選項中三個都是常見迷思:誤以為Heparin可用、誤以為循環核酸是高分子量、誤以為全血可長期保存。考生要記住cfDNA是「短片段、低濃度、易被基因組DNA污染」三大特性,故必須用血漿並速分離。
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