專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)113 年第 48 題單選題
DNA經重亞硫酸鈉處理,再轉換為鹼性環境後,未甲基化的胞嘧啶會轉換為何?
A胞嘧啶
B胸腺嘧啶
C尿嘧啶正確答案
D5-甲基胞嘧啶
C正確答案
重亞硫酸鈉(bisulfite)處理:未甲基化胞嘧啶(C)→尿嘧啶(U),甲基化C則不變,是甲基化分析的核心原理。
為什麼答案是 C
正解。未甲基化的胞嘧啶經重亞硫酸鈉脫胺基反應,先形成磺化中間物,再於鹼性環境去磺化後轉換為尿嘧啶(uracil),此為bisulfite轉換的直接化學產物。
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完整詳解
Pro · 無限重點 重亞硫酸鈉(bisulfite)處理:未甲基化胞嘧啶(C)→尿嘧啶(U),甲基化C則不變,是甲基化分析的核心原理。
口訣:「未甲基化→變U,甲基化→不變C」。PCR後U會被讀成T。
逐選項分析
A✕ 陷阱
胞嘧啶維持不變的是「已甲基化(5-mC)」的位點,而非未甲基化者。未甲基化的C在bisulfite處理下會被脫胺基轉換,不會保持原樣。
B✕ 陷阱
胸腺嘧啶(T)是後續PCR擴增時,由轉換出的尿嘧啶(U)被當作T配對複製而來,並非bisulfite化學反應的「直接」產物,故為陷阱選項。
C✓ 正確
正解。未甲基化的胞嘧啶經重亞硫酸鈉脫胺基反應,先形成磺化中間物,再於鹼性環境去磺化後轉換為尿嘧啶(uracil),此為bisulfite轉換的直接化學產物。
D✕
5-甲基胞嘧啶(5-mC)是甲基化的原始狀態,它對bisulfite反應有抗性而維持不變,並非由未甲基化C轉換生成,方向相反。
Bisulfite 轉換結果對照
| 原始鹼基 | bisulfite處理後 | PCR後讀到 | 意義 |
|---|
| 未甲基化 C | 尿嘧啶 U | T | 未甲基化位點 |
| 甲基化 5-mC | 維持 C | C | 甲基化位點 |
本題問的是bisulfite「化學反應的直接產物」,答案是尿嘧啶(U);而胸腺嘧啶(T)是後續PCR擴增才出現的。考生若記成「變成T」會誤選B,務必區分化學轉換階段與定序判讀階段。
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