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專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)104 年第 53 題單選題考點:已知 vs 未知 SNP考點:3' 端錯配辨識

關於oligo ligation assay偵測single nucleotide polymorphism(SNP)之敘述,下列何者正確?

A可廣泛應用於偵測未知的SNP
B主要是利用探針3' 端最後一個核苷酸的差異來分辨SNP正確答案
C反應中需加入DNA ligase和DNA polymerase
D反應中需要二個不同的capture probes和二個不同的reporter probes來分辨SNP
答案與詳解
B
正確答案
OLA 透過兩條探針在 SNP 位點交界處連接,3' 端核苷酸需與模板完美互補才能被 DNA ligase 接上,藉此分辨 SNP。

逐選項解析

A可廣泛應用於偵測未知的SNP已知 vs 未知 SNP✕ 易錯陷阱
OLA 必須先知道 SNP 位點與序列才能設計專一性探針,屬於「已知 SNP 偵測」方法。偵測未知 SNP 應用 sequencing、SSCP、DHPLC 等。
B主要是利用探針3' 端最後一個核苷酸的差異來分辨SNP3' 端錯配辨識✓ 正確
OLA 設計兩條相鄰探針,上游探針 3' 端最後一個核苷酸正對 SNP 位點。若與模板完美配對,DNA ligase 才能將兩探針接合;若錯配則無法連接,藉此分辨基因型。
C反應中需加入DNA ligase和DNA polymerase✕ 易錯陷阱
D反應中需要二個不同的capture probes和二個不同的reporter probes來分辨SNP✕ 易錯陷阱

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