專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學（包括寄生蟲學）104 年第 56 題單選題
下列何種方法最常被用來檢測微衛星不穩定性（Microsatellite instability）？
A毛細管電泳（Capillary electrophoresis）正確答案
BRestriction fragment length polymorphism
CDNA sequencing
DSingle-strand conformation polymorphism
A正確答案
微衛星不穩定性 (MSI) 檢測首選毛細管電泳，能精準分辨 1-2 bp 的長度差異。
為什麼答案是 A
毛細管電泳對 1-2 bp 的 PCR 產物長度差異具高解析度，搭配螢光標記引子可同時分析多個微衛星位點 (如 BAT-25, BAT-26, D2S123 等 Bethesda panel)，是臨床檢測 MSI 的金標準方法。
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完整詳解
Pro · 無限重點 微衛星不穩定性 (MSI) 檢測首選毛細管電泳，能精準分辨 1-2 bp 的長度差異。
看到「微衛星」「短片段長度差異」就選毛細管電泳，因 MSI 重點是「長度變化」而非序列變化。
逐選項分析
A✓ 正確
毛細管電泳對 1-2 bp 的 PCR 產物長度差異具高解析度，搭配螢光標記引子可同時分析多個微衛星位點 (如 BAT-25, BAT-26, D2S123 等 Bethesda panel)，是臨床檢測 MSI 的金標準方法。
B✕
RFLP 是利用限制酶切點變化偵測 SNP 或大片段長度多型性，無法解析微衛星僅 1-2 bp 的細微差異，且微衛星區域通常不含特定酶切位點變化，不適用於 MSI 檢測。
C✕ 陷阱
DNA 定序雖可偵測序列變化，但 MSI 的核心是重複序列「長度」改變而非「鹼基」改變，定序對連續重複序列易出現 stutter peak 干擾，且成本高、通量低，非臨床首選。
D✕
SSCP 是依單股 DNA 二級構形差異偵測點突變，主要用於 SNP 篩檢，無法精準分辨微衛星重複數目的長度差異，靈敏度與解析度皆不適合 MSI 分析。
分子檢驗方法對照
| 方法 | 偵測標的 | 適用情境 | MSI 適用? |
|---|
| 毛細管電泳 | 片段長度 (1-2 bp) | 微衛星、STR、片段分析 | ✅ 首選 |
| RFLP | 限制酶切點變化 | SNP、大片段多型性 | ❌ |
| DNA Sequencing | 鹼基序列 | 點突變、未知突變 | △ 可但非首選 |
| SSCP | 單股構形差異 | 點突變篩檢 | ❌ |
考生易誤選 C「DNA sequencing」認為定序最精準。但 MSI 重點在「重複次數的長度差異」而非鹼基序列，定序面對連續重複區易產生 stutter 雜訊，臨床標準仍是毛細管電泳搭配螢光多重 PCR。
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