專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學（包括寄生蟲學）104 年第 64 題單選題
下列何種技術是傳統上用來偵測基因大片段缺失（Large deletion）或重組（Rearrangement）？
A北方墨點法
B南方墨點法正確答案
C溫度梯度膠體電泳
D變性梯度膠體電泳
B正確答案
Southern blot 是傳統偵測 DNA 大片段缺失或重組的標準技術。
為什麼答案是 B
南方墨點法（Southern blot）將 DNA 經限制酶切割、電泳分離後轉印至膜上，再以特定探針雜交。當 DNA 出現大片段缺失或重組時，限制酶切割產生的片段大小會改變，呈現異常條帶，是傳統偵測此類變異的金標準。
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完整詳解
Pro · 無限重點 Southern blot 是傳統偵測 DNA 大片段缺失或重組的標準技術。
看到「DNA 大片段變化」→ 直覺 Southern blot；RNA 用 Northern；蛋白質用 Western。
逐選項分析
A✕ 陷阱
北方墨點法（Northern blot）是偵測 RNA 表現量與大小的方法，用於分析基因表現，而非 DNA 結構變化，無法偵測 DNA 大片段缺失或重組。
B✓ 正確
南方墨點法（Southern blot）將 DNA 經限制酶切割、電泳分離後轉印至膜上，再以特定探針雜交。當 DNA 出現大片段缺失或重組時，限制酶切割產生的片段大小會改變，呈現異常條帶，是傳統偵測此類變異的金標準。
C✕
溫度梯度膠體電泳（TGGE）利用溫度梯度造成 DNA 變性，主要偵測單一鹼基突變或小片段序列差異，不適合偵測大片段缺失或重組。
D✕
變性梯度膠體電泳（DGGE）以化學變性劑梯度區分序列差異，主要用於檢測單核苷酸變異（SNP）或小片段差異，不適用於偵測大片段缺失。
墨點法（Blotting）三兄弟對照
| 技術 | 偵測對象 | 主要用途 | 可偵測大片段變化 |
|---|
| Southern blot | DNA | 基因缺失、重組、RFLP | ✅ 可 |
| Northern blot | RNA | 基因表現量、mRNA 大小 | ❌ |
| Western blot | 蛋白質 | 蛋白質鑑定、定量 | ❌ |
Blotting 家族最愛考的就是「南北混淆」跟「檢測標的錯配」。Southern blot 專攻 DNA 大片段變異(缺失、重組、插入),Northern blot 則看 RNA 表現量,兩者技術原理相同但標的完全不同。關鍵判斷:題目出現「基因缺失」「染色體重組」「大片段異常」就選 Southern;看到「表現量」「轉錄本」就選 Northern。至於 DGGE 和 TGGE 都是偵測點突變的電泳技術,跟 blotting 根本不同掛,考生常因為名稱有「ge」就誤以為也能抓大片段變異,實際上這兩者解析度只到單一鹼基突變層級。
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