專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)110 年第 48 題單選題
下列何種方法最不適宜用來檢測單核苷酸多型性(Single nucleotide polymorphism)?
ATaqMan real-time PCR
BChromosome karyotyping正確答案
CHigh-resolution melting curve analysis
DSingle-strand conformation polymorphism
B正確答案
SNP是單一鹼基的變異,染色體核型分析(karyotyping)只能看染色體層級的大結構異常,無法偵測單一鹼基變化,故最不適宜。
為什麼答案是 B
染色體核型分析在光學顯微鏡下觀察整套染色體的數目與大型結構(如缺失、易位、三染色體),解析度僅能到Mb等級,根本無法看到單一鹼基的變異,故最不適宜檢測SNP。
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完整詳解
Pro · 無限重點 SNP是單一鹼基的變異,染色體核型分析(karyotyping)只能看染色體層級的大結構異常,無法偵測單一鹼基變化,故最不適宜。
看「解析度」!SNP是1個鹼基的變化,karyotyping看的是整條染色體,尺度差太多,直接選B。
逐選項分析
A✕
TaqMan real-time PCR利用對偶基因專一性探針(allele-specific probe)搭配螢光訊號,可區分不同等位基因,是SNP基因分型(genotyping)的常用方法,適合檢測SNP。
B✓ 正確
染色體核型分析在光學顯微鏡下觀察整套染色體的數目與大型結構(如缺失、易位、三染色體),解析度僅能到Mb等級,根本無法看到單一鹼基的變異,故最不適宜檢測SNP。
C✕
高解析度溶解曲線分析(HRM)依據PCR產物因序列差異造成的解離溫度(Tm)細微變化來判別,連單一鹼基差異都能分辨,是常見的SNP偵測方法。
D✕
單股構型多型性(SSCP)利用單股DNA因序列差異形成不同二級構型而在電泳遷移率不同,可偵測包含SNP在內的點突變,是傳統的突變篩檢方法。
SNP檢測方法 vs 解析度
| 方法 | 原理 | 可偵測尺度 | 適不適合SNP |
|---|
| TaqMan real-time PCR | 等位基因專一探針+螢光 | 單鹼基 | 適合 |
| HRM analysis | 解離溫度差異 | 單鹼基 | 適合 |
| SSCP | 單股構型遷移率 | 單鹼基/點突變 | 適合 |
| Chromosome karyotyping | 顯微鏡看整套染色體 | Mb等級大結構 | 不適合 |
本題是反向題(問最不適宜),陷阱在於四個選項都是檢驗實驗室常見技術,但karyotyping的觀察尺度是整條染色體(百萬鹼基級),與SNP單一鹼基的尺度差了千萬倍,根本看不到,故為唯一不適宜者。
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