專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學（包括寄生蟲學）110 年第 17 題單選題
關於痰液Ziehl-Neelsen染色法的敘述，下列何者錯誤？
A抗酸性桿菌呈現紫紅色
B與黴菌酸（mycolic acid）反應
C甲基藍為對比染色
D結果以400倍視野判讀正確答案
D正確答案
Ziehl-Neelsen 抗酸染色判讀必須用油鏡（1000倍），而非400倍，故D錯誤。
為什麼答案是 D
錯誤！抗酸菌體積極小，必須使用油浸鏡頭（oil immersion，1000倍）判讀，而非400倍高倍視野。臨床報告也是以1000倍油鏡計數每視野菌量，這是本題要選的錯誤敘述。
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完整詳解
Pro · 無限重點 Ziehl-Neelsen 抗酸染色判讀必須用油鏡（1000倍），而非400倍，故D錯誤。
看到「400倍判讀抗酸菌」直接選錯——抗酸菌很小，一定要油鏡1000倍。
逐選項分析
A✕
Ziehl-Neelsen 染色中，抗酸性桿菌（如結核分枝桿菌）能抵抗酸性酒精脫色，保留carbol fuchsin的紅色，呈現紫紅色（紅至桃紅色）桿菌，敘述正確。
B✕
分枝桿菌細胞壁含大量黴菌酸（mycolic acid），具高度疏水性與脂質特性，能與carbol fuchsin結合並抗酸脫色，這正是抗酸染色的原理基礎，敘述正確。
C✕
Ziehl-Neelsen 染色使用methylene blue（甲基藍/亞甲藍）作為對比染色（counterstain），讓非抗酸性的背景物質與細胞染成藍色，凸顯紅色的抗酸菌，敘述正確。
D✓ 正確
錯誤！抗酸菌體積極小，必須使用油浸鏡頭（oil immersion，1000倍）判讀，而非400倍高倍視野。臨床報告也是以1000倍油鏡計數每視野菌量，這是本題要選的錯誤敘述。
Ziehl-Neelsen 抗酸染色重點
| 步驟 | 試劑 | 顏色結果 | 備註 |
|---|
| 初染 | Carbol fuchsin | 抗酸菌→紅色 | 加熱助染 |
| 脫色 | 酸性酒精 | 抗酸菌不褪色 | 區別關鍵 |
| 對比染色 | Methylene blue（甲基藍） | 背景→藍色 | counterstain |
| 判讀 | 油鏡 1000× | 紅桿菌計數 | 非400倍 |
前三選項（紫紅色、黴菌酸、甲基藍對比染色）都是正確原理，唯獨D把判讀倍率寫成400倍。抗酸菌很細小，臨床標準是油鏡1000倍計數，考生若不熟操作細節易被前面正確敘述帶過而漏掉D。
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