專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學（包括寄生蟲學）114 年第 71 題單選題
下列何者是用多對引子（primers）同時偵測多種可能病毒感染的方法？
Anested PCR
Bmultiplex PCR正確答案
Chybrid capture assay
Drandom PCR
B正確答案
Multiplex PCR（多重PCR）能在同一反應管中加入多對引子，同時擴增並偵測多種不同的標的基因，最適合用於同時篩檢多種病毒感染。
為什麼答案是 B
Multiplex PCR（多重PCR）在同一個反應中加入多對特異性引子，可同時擴增多個不同的基因片段，常用於多重病原體的同步檢測。
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完整詳解
Pro · 無限重點 Multiplex PCR（多重PCR）能在同一反應管中加入多對引子，同時擴增並偵測多種不同的標的基因，最適合用於同時篩檢多種病毒感染。
看到關鍵字「多對引子」加上「同時偵測多種」，直接秒選帶有「多重」意思的 Multiplex PCR。
逐選項分析
A✕ 陷阱
Nested PCR（巢式PCR）雖然也使用兩對引子（外引子與內引子），但它是針對「單一」標的進行兩次連續擴增，目的是提高靈敏度與特異性，而非同時偵測多種病毒。
B✓ 正確
Multiplex PCR（多重PCR）在同一個反應中加入多對特異性引子，可同時擴增多個不同的基因片段，常用於多重病原體的同步檢測。
C✕
Hybrid capture assay（雜交捕獲分析）是一種基於核酸雜交的訊號放大技術（常用於HPV檢測），並非使用多對引子進行基因擴增的PCR方法。
D✕
Random PCR（隨機PCR）使用隨機序列的引子進行擴增，通常用於未知序列的探索或全基因組擴增，無法特異性地同時偵測多種已知病毒。
常見特殊PCR技術比較
| 技術名稱 | 引子特徵 | 主要目的與應用 |
|---|
| Multiplex PCR (多重PCR) | 多對不同的特異性引子 | 同時偵測多種不同的病原體或基因突變 |
| Nested PCR (巢式PCR) | 兩對引子 (外引子與內引子) | 針對單一標的進行兩次擴增，大幅提高靈敏度與特異性 |
| Random PCR (隨機PCR) | 隨機序列引子 (Random hexamers) | 擴增未知序列或進行全基因組擴增 |
考生容易因為 Nested PCR 也使用了「兩對引子」而誤選。必須釐清：Nested PCR 的多對引子是為了『同一個目標』的雙重確認；而 Multiplex PCR 的多對引子是為了『同時抓多個不同目標』。
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