專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學（包括寄生蟲學）114 年第 76 題單選題
血癌病人在經過治療之後，多數病人血液或骨髓中的癌細胞分別降至1／100或1／1000以下，下列何種方法最有可能偵測到這些微量殘存的癌細胞？
A原位螢光雜交分析
B南方墨點分析
C染色體核型分析
D即時定量聚合酶連鎖反應正確答案
D正確答案
偵測微量殘存疾病（MRD）需要極高敏感度，即時定量PCR（RQ-PCR）敏感度可達百萬分之一，為最佳選擇。
為什麼答案是 D
即時定量聚合酶連鎖反應（RQ-PCR）敏感度極高，可達 10^-4~10^-6，是臨床上偵測微量殘存疾病（MRD）的首選高敏感度分子檢驗方法。
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完整詳解
Pro · 無限重點 偵測微量殘存疾病（MRD）需要極高敏感度，即時定量PCR（RQ-PCR）敏感度可達百萬分之一，為最佳選擇。
看到「微量殘存癌細胞（MRD）」與「1/1000以下」，直接選敏感度最高、能將訊號指數放大的 PCR 相關技術。
逐選項分析
A✕ 陷阱
原位螢光雜交分析（FISH）敏感度約 1%~0.1% (10^-2~10^-3)，雖然能觀察單一細胞，但受限於計數細胞總數，不足以穩定偵測 1/1000 以下的微量殘存細胞。
B✕
南方墨點分析（Southern blot）敏感度約 1%~5% (10^-2)，主要用於偵測基因重排，無法偵測極微量細胞。
C✕
染色體核型分析（Karyotyping）敏感度最低，約 1%~5% (10^-2)，通常只觀察約 20 個細胞分裂相，無法用於微量殘存追蹤。
D✓ 正確
即時定量聚合酶連鎖反應（RQ-PCR）敏感度極高，可達 10^-4~10^-6，是臨床上偵測微量殘存疾病（MRD）的首選高敏感度分子檢驗方法。
血液腫瘤常用檢驗方法敏感度比較
| 檢驗方法 | 敏感度 (偵測極限) | 臨床應用 |
|---|
| 染色體核型分析 (Karyotyping) | 10^-1 ~ 10^-2 (1~5%) | 初步診斷、大範圍染色體異常 |
| 南方墨點分析 (Southern blot) | 10^-1 ~ 10^-2 (1~5%) | 基因重排確認 (早期方法) |
| 原位螢光雜交分析 (FISH) | 10^-2 ~ 10^-3 (0.1~1%) | 特定基因融合或缺失偵測 |
| 即時定量 PCR (RQ-PCR) | 10^-4 ~ 10^-6 (0.01~0.0001%) | 微量殘存疾病 (MRD) 追蹤 |
考生可能知道 FISH 可以看單一細胞，就誤以為它能輕易找到微量細胞。但 FISH 每次能人工或儀器計數的細胞數量有限（通常幾百到一千顆），因此整體敏感度（約 1/100~1/1000）遠不及能將微量核酸呈指數放大的 PCR 技術（可達 1/100,000 以上）。
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