PCR 是分子檢驗常用的核酸放大技術，關於延伸技術的敘述，下列何者最正確？ (A) nested PCR 可提高 PCR 反應的 specificity 和 sensitivity (B) 進行 semi-nested PCR 時，反應中一共有 4 個 primers (C) PCR 之 tailed primer method，可增加 PCR 的 specificity，但不會增加 sensitivity (D) gap-PCR 適合用來偵測核酸點突變

專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學（包括寄生蟲學）112 年第 54 題單選題考點：巢式PCR優點考點：半巢式引子數

PCR 是分子檢驗常用的核酸放大技術，關於延伸技術的敘述，下列何者最正確？

Anested PCR 可提高 PCR 反應的 specificity 和 sensitivity正確答案

B進行 semi-nested PCR 時，反應中一共有 4 個 primers

CPCR 之 tailed primer method，可增加 PCR 的 specificity，但不會增加 sensitivity

Dgap-PCR 適合用來偵測核酸點突變

答案與詳解

正確答案

nested PCR 用兩對引子做兩階段擴增，能同時提升專一性與靈敏度，是最正確的敘述。

Anested PCR 可提高 PCR 反應的 specificity 和 sensitivity巢式PCR優點✓ 正確

nested PCR 第一輪用外側引子擴增，再以內側引子對第一輪產物做第二輪。雙重引子配對降低非專一性結合，提高 specificity；二段放大也增加 sensitivity，敘述完全正確。

B進行 semi-nested PCR 時，反應中一共有 4 個 primers半巢式引子數✕ 易錯陷阱

semi-nested PCR 第二輪只更換一支內側引子，另一支沿用第一輪的引子，因此整體只用 3 個 primers，而非 4 個。full nested 才用到 4 個引子（兩對），此處名詞被偷換。

CPCR 之 tailed primer method，可增加 PCR 的 specificity，但不會增加 sensitivity✕ 錯誤

Dgap-PCR 適合用來偵測核酸點突變✕ 易錯陷阱

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