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專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)112 年第 56 題單選題

Allele-specific oligonucleotide hybridization 廣泛使用在癌症與遺傳疾病的分子鑑定上,在探針的設計上,下列敘述何者最適當?

A序列長度大約在 20 個核苷酸左右正確答案
B擬偵測之單一核苷酸差異點最好設計在 3'末端鹼基位置
C只需設計偵測突變的探針即可
D檢測靈敏度與特異性都很高
答案與詳解
A
正確答案
ASO 探針長度約 15-21 個核苷酸,突變點應設計在探針中央以最大化不配對時的不穩定性,且必須同時設計野生型與突變型探針。

逐選項解析

A序列長度大約在 20 個核苷酸左右✓ 正確
B擬偵測之單一核苷酸差異點最好設計在 3'末端鹼基位置✕ 易錯陷阱
擬偵測的單一核苷酸差異點應設計在探針的「中央」位置。若設計在末端(如 3' 或 5' 端),不配對時對整體雙股螺旋的破壞力較小,容易發生非特異性結合(偽陽性)。
C只需設計偵測突變的探針即可✕ 錯誤
必須同時設計「野生型(正常)」與「突變型」兩種探針,並分別進行雜交反應,才能準確判斷受檢者是同型合子(Homozygous)還是異型合子(Heterozygous)。
D檢測靈敏度與特異性都很高✕ 錯誤

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