專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)112 年第 68 題單選題
下列何種病毒分子定量檢測方法,不是在恆溫(isothermal)進行?
Aloop-mediated isothermal amplification(LAMP)
Bgap-ligase chain reaction(gap-LCR)正確答案
Cnucleic acid sequence-based amplification(NASBA)
Dspecific high sensitivity enzymatic reporter unLOCKing(SHERLOCK)
B正確答案
LAMP、NASBA、SHERLOCK 皆為恆溫核酸擴增技術;gap-LCR(連接酶鏈反應)需熱循環升降溫,非恆溫。
為什麼答案是 B
gap-LCR 屬連接酶鏈反應(LCR),需透過變性、黏合、連接的熱循環反覆升降溫,依賴 thermal cycler,並非在單一恆定溫度下進行,故為正解。
載入中…
完整詳解
Pro · 無限重點 LAMP、NASBA、SHERLOCK 皆為恆溫核酸擴增技術;gap-LCR(連接酶鏈反應)需熱循環升降溫,非恆溫。
名稱有 isothermal(LAMP)或屬連接酶鏈反應系列(LCR)就是關鍵。LCR 需熱循環=非恆溫,選 B。
逐選項分析
A✕
LAMP(環介導恆溫擴增)名稱中即含 isothermal,利用 Bst 聚合酶於約 60-65°C 單一溫度進行擴增,完全恆溫,故非答案。
B✓ 正確
gap-LCR 屬連接酶鏈反應(LCR),需透過變性、黏合、連接的熱循環反覆升降溫,依賴 thermal cycler,並非在單一恆定溫度下進行,故為正解。
C✕
NASBA(核酸序列擴增)以 RNA 為模板,藉由反轉錄酶、RNase H 與 T7 RNA 聚合酶協同作用,於約 41°C 恆溫進行,常用於 RNA 病毒定量,屬恆溫技術。
D✕
SHERLOCK 結合 RPA(重組酶聚合酶擴增)與 CRISPR-Cas13,整體於恆溫下操作,屬恆溫核酸檢測平台,故非答案。
核酸擴增技術溫度需求對照
| 方法 | 溫度模式 | 核心酵素 | 是否恆溫 |
|---|
| LAMP | 約60-65°C 單溫 | Bst 聚合酶 | 是 |
| NASBA | 約41°C 單溫 | 反轉錄酶/T7聚合酶 | 是 |
| SHERLOCK | 恆溫(RPA+Cas13) | RPA酵素/Cas13 | 是 |
| gap-LCR | 需熱循環升降溫 | 連接酶/聚合酶 | 否 |
本題為反向題,要選『不是恆溫』者。三個選項皆為恆溫技術,唯獨 gap-LCR 屬連接酶鏈反應,與 PCR 同樣需要熱循環。考生若只看到 LAMP 名稱含 isothermal 就停手,易掉入陷阱。
醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學) 相關題目