專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)112 年第 55 題單選題
臨床上常使用增幅阻礙突變系統(ARMS)進行等位基因特異性檢驗,下列敘述何者最適當?
A可以偵測已知及未知的基因突變點
B可以偵測大片段突變(例如 deletion)
C引子設計突變位置在 3'末端鹼基正確答案
D不能同時檢測多個突變點
C正確答案
ARMS 靠引子 3' 末端鹼基與突變位完全互補才能延伸,故只能偵測「已知」點突變,引子設計關鍵在 3' 末端。
為什麼答案是 C
ARMS 核心原理:將突變或正常的鹼基設計在引子 3' 末端,因 DNA 聚合酶缺乏 3'→5' 校對活性,末端不配對時無法有效延伸,達到等位基因專一性偵測,此為最適當敘述。
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完整詳解
Pro · 無限重點 ARMS 靠引子 3' 末端鹼基與突變位完全互補才能延伸,故只能偵測「已知」點突變,引子設計關鍵在 3' 末端。
記住 ARMS = 引子 3' 末端是「開關」,配對才延伸 → 只能測已知點突變。
逐選項分析
A✕ 陷阱
ARMS 必須事先知道突變序列才能設計專一性引子,無法偵測未知突變點。它是針對「已知」點突變的等位基因特異性 PCR,故此敘述錯誤。
B✕
ARMS 著重在單一鹼基差異(點突變/SNP)的辨別,靠引子 3' 末端配對與否決定能否延伸,並不適合偵測大片段缺失(deletion),故此敘述不適當。
C✓ 正確
ARMS 核心原理:將突變或正常的鹼基設計在引子 3' 末端,因 DNA 聚合酶缺乏 3'→5' 校對活性,末端不配對時無法有效延伸,達到等位基因專一性偵測,此為最適當敘述。
D✕
ARMS 可結合多重 PCR(multiplex ARMS)設計多組引子,同時檢測多個突變點,因此「不能同時檢測多個突變點」的敘述錯誤。
ARMS(增幅阻礙突變系統)特性
| 項目 | 內容 |
|---|
| 偵測目標 | 已知的點突變 / SNP |
| 關鍵設計 | 突變鹼基置於引子 3' 末端 |
| 原理 | 末端不配對 → 無法延伸 → 不擴增 |
| 限制 | 無法測未知突變、不適合大片段缺失 |
| 延伸應用 | 多重 ARMS 可同時測多個突變點 |
A、D 選項是常見陷阱:考生易誤以為 ARMS 萬能可測未知突變或無法多重。實際上 ARMS 只能測「已知」點突變,但可透過多重設計同時測多點。記住核心在 3' 末端的專一性配對。
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