二維電泳配合蛋白質譜分析的實驗前後順序，下列何者最適當？①特定酵素水解蛋白 ②一維等電點聚焦電泳 ③膠體染色 ④檢體製備 ⑤二維聚丙烯醯胺凝膠電泳
A④②⑤③①正確答案
B④①②⑤③
C④③①②⑤
D①②③⑤④
答案與詳解
逐選項解析
A④②⑤③①標準2-DE流程✓ 正確
④檢體製備→②一維等電點聚焦(依等電點分離)→⑤二維SDS-PAGE(依分子量分離)→③膠體染色(顯影蛋白點)→①特定酵素(如trypsin)水解切下的目標蛋白點再送質譜，順序完全正確。
B④①②⑤③順序顛倒✕ 易錯陷阱
把①酵素水解放在電泳前是錯誤的。蛋白質應先以完整型態進行二維分離與染色，鎖定目標蛋白點後才切膠並酵素水解成胜肽片段，才能送質譜定序鑑定。
C④③①②⑤✕ 錯誤
D①②③⑤④✕ 錯誤
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