專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)104 年第 77 題單選題
下列何者對PCR酵素活性的影響最大?
AACD(Acid citrate dextrose)與EDTA(Ethylenediaminetetraacetic acid)抗凝劑
BEDTA(Ethylenediaminetetraacetic acid)與Heparin抗凝劑
CHeparin抗凝劑與Hemoglobin正確答案
DACD(Acid citrate dextrose)抗凝劑與Hemoglobin
C正確答案
Heparin 是 PCR 最強抑制劑,Hemoglobin(血紅素中的 heme)也會強烈抑制 Taq polymerase 活性。
為什麼答案是 C
Heparin 會與 Taq polymerase 結合並抑制酵素活性;Hemoglobin 釋出的 heme(亞鐵血紅素)也是已知最強的 PCR 抑制物之一。兩者組合對 PCR 影響最大。
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完整詳解
Pro · 無限重點 Heparin 是 PCR 最強抑制劑,Hemoglobin(血紅素中的 heme)也會強烈抑制 Taq polymerase 活性。
記口訣:『肝素血紅素,PCR 大魔王』。Heparin + Hemoglobin 是 PCR 抑制雙煞。
逐選項分析
A✕
ACD 與 EDTA 雖然都會螯合 Mg²⁺ 影響 Taq polymerase,但稀釋後影響有限,且 EDTA 在分子檢驗中常被接受。非影響最大者。
B✕ 陷阱
雖然 Heparin 是強抑制劑,但 EDTA 對 PCR 影響相對溫和(甚至是 PCR 採血首選抗凝劑),組合起來影響不如 C 強。
C✓ 正確
Heparin 會與 Taq polymerase 結合並抑制酵素活性;Hemoglobin 釋出的 heme(亞鐵血紅素)也是已知最強的 PCR 抑制物之一。兩者組合對 PCR 影響最大。
D✕
Hemoglobin 確實是強抑制劑,但 ACD(檸檬酸類)對 PCR 影響相對小於 Heparin。組合強度不及 C。
PCR 常見抑制物強度排行
| 物質 | 抑制機轉 | 強度 | PCR 適用性 |
|---|
| Heparin | 結合 Taq、干擾模板 | ★★★★★ | 禁用 |
| Hemoglobin (heme) | heme 結合 Taq 抑制聚合 | ★★★★★ | 需移除 |
| EDTA | 螯合 Mg²⁺ | ★★ | 可接受(首選抗凝劑) |
| ACD / Citrate | 螯合 Ca²⁺/Mg²⁺ | ★★ | 可接受 |
考生看到 EDTA 容易反射認為它會螯合 Mg²⁺ 而選 A 或 B,但實際上 EDTA 在 PCR 採血中是『首選』抗凝劑。真正的兩大殺手是 Heparin(直接抑制 Taq)與 Hemoglobin(heme 抑制聚合反應)。
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