專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)104 年第 56 題單選題考點:Tm 計算錯誤考點:鹼基數錯陷阱
南方墨點法之探針,其序列為5'-GGACCGTAAGCATCTAGGTCG-3',此探針的melting point(Tm值)大約是多少℃?
C正確答案
DNA 探針 Tm 值用 Wallace rule 計算:Tm = 4×(G+C) + 2×(A+T),21-mer 探針算出 66°C。
逐選項解析
A55Tm 計算錯誤✕ 錯誤
55°C 算錯了。若誤把 GC 與 AT 比例算反,或用其他公式估算才會得到此值。本題序列 GC 含量高達 12 個,Tm 不會這麼低。
B60鹼基數錯陷阱✕ 易錯陷阱
60°C 是常見陷阱值,若把 GC 數量誤算為 10 個(實際 12 個),會得 4×10 + 2×11 = 62,仍非 60。考生易因數錯鹼基而選此。
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