專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)104 年第 72 題單選題
下列何種HLA分型方法最容易找到新的HLA等位基因(Allele)?
A序列特異性聚合酶連鎖反應(Sequence-specific primer-PCR)
B特異性寡核苷酸探針(Sequence-specific oligonucleotide probe)
CDNA定序(Sequence-based typing)正確答案
D血清學方法
C正確答案
DNA定序(SBT)能直接讀出鹼基序列,是發現新HLA等位基因的黃金方法。
為什麼答案是 C
SBT 直接定序 HLA 基因,可逐一讀出每個鹼基。若出現資料庫沒有的新序列變異,能立即被發現,是 HLA 新等位基因鑑定與發表的標準方法。
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完整詳解
Pro · 無限重點 DNA定序(SBT)能直接讀出鹼基序列,是發現新HLA等位基因的黃金方法。
看到「找新基因/新突變」→ 直接選定序法(Sequencing),因為只有定序能讀出未知序列。
逐選項分析
A✕
SSP-PCR 用已知序列設計專一性引子,只能驗證「已知」等位基因是否存在,無法偵測未知變異。新基因若不符合任何引子,反而檢測不到。
B✕ 陷阱
SSOP 用已知序列的探針進行雜交,同樣只能辨識資料庫中既有的等位基因。新等位基因可能與所有探針都不完全匹配而被漏掉或誤判。
C✓ 正確
SBT 直接定序 HLA 基因,可逐一讀出每個鹼基。若出現資料庫沒有的新序列變異,能立即被發現,是 HLA 新等位基因鑑定與發表的標準方法。
D✕
血清學方法用抗體辨識 HLA 蛋白抗原,解析度低且只能分到抗原大類(如 HLA-A2),連不同 allele 都分不清,更不可能發現新等位基因。
HLA 分型方法解析度比較
| 方法 | 原理 | 解析度 | 能否發現新Allele |
|---|
| 血清學 | 抗體-抗原反應 | 低(抗原層級) | ✗ |
| SSP-PCR | 專一性引子擴增 | 中(allele群) | ✗ 需已知序列 |
| SSOP | 專一性探針雜交 | 中(allele群) | ✗ 需已知序列 |
| SBT 定序 | 直接讀取DNA序列 | 高(單一allele) | ✓ 黃金標準 |
考生易誤以為 PCR 類分子方法解析度都很高就能找新基因。關鍵差異在「是否需預先知道序列」:SSP/SSOP 都是『驗證已知』,唯有定序是『讀出未知』。發現新allele一定要選 sequencing-based 的方法。
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