專技高考-醫事檢驗師臨床血清免疫學與臨床病毒學106 年第 41 題單選題
使用fluorescein標定時，其所需之激發光（excitation light）為多少nm？
B正確答案
Fluorescein (FITC) 最大激發光約 490 nm（藍光），放射光約 520 nm（綠光），是免疫螢光最常用的螢光劑。
為什麼答案是 B
Fluorescein (FITC) 最大激發波長約 490 nm（藍光區），吸收後放射出約 520 nm 綠色螢光，為臨床免疫螢光染色 (IFA) 標準波長。
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完整詳解
Pro · 無限重點 Fluorescein (FITC) 最大激發光約 490 nm（藍光），放射光約 520 nm（綠光），是免疫螢光最常用的螢光劑。
看到 fluorescein/FITC → 激發 490、放射 520，「藍光進、綠光出」直接背起來。
逐選項分析
A✕
313 nm 屬 UV 區，是某些紫外光螢光劑（如 DAPI 周邊）的範圍，並非 FITC 的激發波長。
B✓ 正確
Fluorescein (FITC) 最大激發波長約 490 nm（藍光區），吸收後放射出約 520 nm 綠色螢光，為臨床免疫螢光染色 (IFA) 標準波長。
C✕ 陷阱
540 nm 接近 rhodamine/TRITC 的激發範圍（約 540-555 nm），是另一常用螢光劑，易與 FITC 混淆。
D✕
578 nm 為 rhodamine 類螢光劑的放射光附近，不是 FITC 激發光。
常見免疫螢光染劑波長對照
| 螢光劑 | 激發光 (nm) | 放射光 (nm) | 顏色 |
|---|
| FITC (Fluorescein) | 490 | 520 | 綠色 |
| TRITC / Rhodamine | 540-555 | 570-580 | 紅橘色 |
| DAPI | 358 | 461 | 藍色 |
| Texas Red | 595 | 615 | 紅色 |
FITC 跟 rhodamine 系列都是免疫螢光常用染劑,出題者最愛混在一起考波長記憶。FITC 的關鍵記法是「藍激綠放」:490 nm 藍光激發、520 nm 綠光放射,兩者都在 500 上下。最容易搞混的是 rhodamine(TRITC)是「綠激紅放」,激發光 540、放射光 580 左右,數字都比 FITC 大 50 以上。判斷準則:看到 490 就該聯想「藍光區激發 FITC」,若選項出現 540 或 578 這種偏黃紅波段的數字,那是在考你有沒有把兩種染劑的光譜位置記反。 
