專技高考-醫事檢驗師微生物學與臨床微生物學（包括細菌與黴菌）114 年第 4 題單選題
染細菌內孢子（endospore）的染劑最常包括下列何者？
Amalachite green, safranin正確答案
Bmethylene blue, safranin
Cmalachite green, methylene blue
Dacridine orange, methylene blue
A正確答案
內孢子染色採 Schaeffer-Fulton 法：孔雀綠（malachite green）主染 + 番紅（safranin）對比染色。
為什麼答案是 A
Schaeffer-Fulton 染色法：malachite green 加熱後穿透孢子壁成為主染劑（孢子呈綠色），再用 safranin 複染使營養細胞呈紅色，形成鮮明對比。
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完整詳解
Pro · 無限重點 內孢子染色採 Schaeffer-Fulton 法：孔雀綠（malachite green）主染 + 番紅（safranin）對比染色。
看到 endospore 直接聯想「孔雀綠+番紅」這對黃金組合，Schaeffer-Fulton 染色法的標配。
逐選項分析
A✓ 正確
Schaeffer-Fulton 染色法：malachite green 加熱後穿透孢子壁成為主染劑（孢子呈綠色），再用 safranin 複染使營養細胞呈紅色，形成鮮明對比。
B✕ 陷阱
methylene blue 是簡單染色或 Loeffler 染色（如白喉桿菌異染顆粒）用的，不是內孢子主染劑。搭配 safranin 並不構成標準內孢子染色。
C✕
malachite green 方向對，但對比染色應為 safranin（紅色）才能凸顯營養細胞，而非 methylene blue（藍色）。顏色對比不足。
D✕
acridine orange 是螢光染劑用於核酸染色（活菌偵測），methylene blue 是簡單染色劑，兩者皆與內孢子染色無關。
常見細菌染色法對照
| 染色法 | 主染劑 | 對比/複染 | 應用 |
|---|
| 內孢子染色 (Schaeffer-Fulton) | malachite green 孔雀綠 | safranin 番紅 | Bacillus、Clostridium 孢子 |
| 革蘭氏染色 (Gram) | crystal violet | safranin | 區分 G(+)/G(-) |
| 抗酸性染色 (Ziehl-Neelsen) | carbolfuchsin | methylene blue | 結核分枝桿菌 |
| 莢膜染色 | india ink / crystal violet | safranin | 肺炎鏈球菌、新型隱球菌 |
內孢子與抗酸染色是微生物學最常搞混的兩大染色法,因為兩者都需要加熱助染、都是特殊染色、都有主染劑加對比染劑的組合。關鍵判斷準則:內孢子用「孔雀綠配番紅」(Schaeffer-Fulton法),抗酸染色用「石碳酸複紅配亞甲藍」(Ziehl-Neelsen法)。考選部最愛把這兩組染劑交叉配對出陷阱選項,或是混入革蘭氏染色的結晶紫、螢光染劑等無關物質。記住顏色聯想:孢子像綠豆(孔雀綠),抗酸菌像紅血球(複紅),就不會記錯配對。
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