專技高考-醫事檢驗師微生物學與臨床微生物學（包括細菌與黴菌）113 年第 78 題單選題
有關檢體直接抹片染色觀察，其染劑及染色法與微生物的配對，下列何者錯誤？
A10% KOH－fungi
Bcalcofluor white－Gram positive bacteria正確答案
Cacid fast stain－mycobacteria
Dperiodic acid-Schiff stain－Candida spp.
B正確答案
Calcofluor white 是螢光染劑，會結合幾丁質與纖維素，用來染黴菌而非革蘭氏陽性菌，故 B 錯誤。
為什麼答案是 B
Calcofluor white 為非特異性螢光染劑，會結合真菌細胞壁的幾丁質與纖維素，在螢光顯微鏡下染出真菌與部分寄生蟲，並非用於革蘭氏陽性菌，配對錯誤，故為本題答案。
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完整詳解
Pro · 無限重點 Calcofluor white 是螢光染劑，會結合幾丁質與纖維素，用來染黴菌而非革蘭氏陽性菌，故 B 錯誤。
看到 calcofluor white 直接聯想到「真菌螢光染色」，配 bacteria 一定錯。
逐選項分析
A✕
10% KOH 可溶解角質與宿主細胞，使真菌的菌絲與孢子更易在顯微鏡下觀察，是檢測皮膚、毛髮、指甲真菌的標準前處理，配對正確。
B✓ 正確
Calcofluor white 為非特異性螢光染劑，會結合真菌細胞壁的幾丁質與纖維素，在螢光顯微鏡下染出真菌與部分寄生蟲，並非用於革蘭氏陽性菌，配對錯誤，故為本題答案。
C✕
抗酸性染色（acid fast stain，如 Ziehl-Neelsen）利用分枝桿菌細胞壁富含分枝菌酸（mycolic acid），染色後不易被酸性酒精脫色，是檢測 mycobacteria 的標準方法，配對正確。
D✕
PAS 染色（periodic acid-Schiff）可染出多醣類與真菌細胞壁的多醣成分，常用於組織切片中觀察 Candida 等真菌，配對正確。
常見染劑與目標微生物對照
| 染劑/染色法 | 原理 | 主要目標 | 備註 |
|---|
| 10% KOH | 溶解角質、清除背景 | 真菌(fungi) | 皮屑、指甲檢體 |
| Calcofluor white | 結合幾丁質/纖維素螢光 | 真菌、Pneumocystis | 需螢光顯微鏡 |
| Acid fast stain | 抗酸不脫色 | 分枝桿菌、Nocardia | Ziehl-Neelsen / Kinyoun |
| PAS stain | 染多醣 | 真菌(Candida等) | 組織切片常用 |
本題為反向題，要選「錯誤配對」。陷阱在 calcofluor white 被故意配給 Gram positive bacteria；考生若不熟悉螢光染劑專用於真菌，容易誤以為配對合理。記住 calcofluor white = 真菌螢光染色。
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