專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)109 年第 61 題單選題
關於分枝鏈DNA(branched DNA,bDNA)技術檢測血液中C型肝炎病毒(HCV)的敘述,何者錯誤?
A三明治核酸雜交分析法
BHCV RNA直接與鹼性磷酸酶標記的探針結合正確答案
C發光強度與血液中HCV RNA量成正比
DHCV RNA被微孔固定的特異性探針捕獲
B正確答案
bDNA 是訊號放大技術,HCV RNA 不直接接 AP 酶,而是透過分枝 DNA 中介層層放大訊號。
為什麼答案是 B
錯誤!HCV RNA 不會直接與 AP 酶探針結合。實際流程是 RNA → target probe → preamplifier → bDNA 分枝 → 最後才接 AP 酶標記探針,中間有多層放大結構。
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完整詳解
Pro · 無限重點 bDNA 是訊號放大技術,HCV RNA 不直接接 AP 酶,而是透過分枝 DNA 中介層層放大訊號。
看到「直接結合鹼性磷酸酶」就是錯!bDNA 的精髓在「分枝放大」,中間隔好幾層才到 AP 酶。
逐選項分析
A✕
bDNA 確實採三明治雜交:下層 capture probe 抓 HCV RNA,上層 extender/bDNA 放大訊號,目標核酸夾在中間,敘述正確。
B✓ 正確
錯誤!HCV RNA 不會直接與 AP 酶探針結合。實際流程是 RNA → target probe → preamplifier → bDNA 分枝 → 最後才接 AP 酶標記探針,中間有多層放大結構。
C✕
AP 酶催化化學發光受質(如 dioxetane),發光強度反映 AP 酶量,進而反映原始 HCV RNA 量,呈正比關係,可定量病毒量,敘述正確。
D✕
微孔盤底固定 capture probe,特異性抓取 HCV RNA 形成固相反應,是 bDNA 第一步的標準設計,敘述正確。
bDNA 訊號放大流程(HCV 檢測)
| 步驟 | 成分 | 功能 |
|---|
| 1. 捕獲 | Capture probe(固定於微孔) | 抓住 HCV RNA |
| 2. 目標連結 | Target probe | 一端接 RNA、一端接 preamplifier |
| 3. 預放大 | Preamplifier | 連接多個 bDNA 分子 |
| 4. 分枝放大 | bDNA(分枝 DNA) | 提供大量結合位 |
| 5. 標記 | AP 酶標記探針 | 結合於 bDNA 分枝末端 |
| 6. 偵測 | 化學發光受質 | 光強度 ∝ HCV RNA 量 |
B 選項偷偷把「中間多層放大結構」省略,讓 HCV RNA 看似直接接 AP 酶。bDNA 的精神就是「分枝層層放大」,若直接接酶就跟一般雜交無異,喪失放大優勢。考生若只記「探針+酶」會中招。
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