專技高考-醫事檢驗師臨床血清免疫學與臨床病毒學115 年第 50 題單選題
有關細胞培養之敘述，下列何者錯誤？
A需要定期檢測是否有黴漿菌污染
B需要定期測試對病毒的感受性
C解凍細胞時放在冰上讓其慢慢溶解正確答案
D冷凍細胞時需要外加抗凍劑
C正確答案
細胞解凍要『快』，37°C 水浴 1-2 分鐘內完成；冷凍才要『慢』。C 完全相反。
為什麼答案是 C
錯誤！解凍冷凍細胞應『快速』於 37°C 水浴中搖晃 1-2 分鐘溶解，避免細胞內冰晶重結晶造成膜損傷及 DMSO 長時間毒性。放冰上慢慢溶解會大幅降低細胞存活率，正好與正確做法相反。
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完整詳解
Pro · 無限重點 細胞解凍要『快』，37°C 水浴 1-2 分鐘內完成；冷凍才要『慢』。C 完全相反。
記口訣：『慢凍快解』。冷凍降溫要慢 (−1°C/min)，解凍要快 (37°C 水浴)，才能減少冰晶傷害。
逐選項分析
A✕
黴漿菌 (Mycoplasma) 無細胞壁、體積小可穿過 0.22μm 濾膜，肉眼與光學顯微鏡難察覺，卻會改變細胞生理與實驗結果，故細胞房 SOP 必定期以 PCR 或 DNA 染色檢測，敘述正確。
B✕
用於病毒分離或培養的細胞株，長期繼代後對病毒的感受性 (susceptibility) 可能下降，需定期以已知病毒滴定確認，以確保診斷與研究結果可靠，敘述正確。
C✓ 正確
錯誤！解凍冷凍細胞應『快速』於 37°C 水浴中搖晃 1-2 分鐘溶解，避免細胞內冰晶重結晶造成膜損傷及 DMSO 長時間毒性。放冰上慢慢溶解會大幅降低細胞存活率，正好與正確做法相反。
D✕
冷凍細胞需添加抗凍劑如 DMSO (5-10%) 或甘油，以降低冰晶形成避免細胞膜破裂，並採慢速降溫 (約 −1°C/min) 至 −80°C 再移入液態氮，敘述正確。
細胞冷凍 vs 解凍 SOP
| 步驟 | 溫度變化 | 速度 | 關鍵試劑/操作 |
|---|
| 冷凍 | 4°C → −80°C → 液氮 | 慢 (−1°C/min) | 加 DMSO 或甘油抗凍劑 |
| 保存 | 液態氮 (−196°C) | - | 長期保存 |
| 解凍 | 液氮 → 37°C | 快 (1-2 分鐘) | 37°C 水浴，立即稀釋去除 DMSO |
命題者把『冷凍要慢、解凍要快』的原則顛倒。考生若只背『細胞要低溫保存』容易落入陷阱，誤以為放冰上溫和解凍比較安全，實則冰上緩慢解凍會使細胞在 DMSO 中暴露過久並產生冰晶重結晶，存活率反而大幅下降。 
