專技高考-醫事檢驗師生物化學與臨床生化學112 年第 1 題單選題
關於常用之蛋白質二維電泳（two-dimensional electrophoresis）的敘述，下列何者較為正確？
A第一維分離通常是 SDS-PAGE
B第一維以胺基酸序列分離蛋白
C第二維以分子量大小分離蛋白正確答案
D第二維的膠體需有 pH 梯度
C正確答案
二維電泳第一維用等電點聚焦(IEF)依pI分離，第二維用SDS-PAGE依分子量大小分離。
為什麼答案是 C
正確。第二維採用SDS-PAGE，SDS使蛋白變性並帶均勻負電，於是依「分子量大小」遷移分離。這是二維電泳的標準設計。
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完整詳解
Pro · 無限重點 二維電泳第一維用等電點聚焦(IEF)依pI分離，第二維用SDS-PAGE依分子量大小分離。
記口訣：第一維「點」(等電點pI)、第二維「重」(分子量)。pH梯度在第一維！
逐選項分析
A✕ 陷阱
第一維是「等電點聚焦(IEF)」依蛋白質的等電點(pI)分離，而非SDS-PAGE。SDS-PAGE是第二維才用，這是把兩維順序對調的典型陷阱。
B✕
第一維分離依據是蛋白質的「等電點(pI)」，利用pH梯度膠中蛋白移動到淨電荷為零的位置聚焦，而非依胺基酸序列分離。電泳無法直接依序列分離。
C✓ 正確
正確。第二維採用SDS-PAGE，SDS使蛋白變性並帶均勻負電，於是依「分子量大小」遷移分離。這是二維電泳的標準設計。
D✕ 陷阱
需要pH梯度的是「第一維」的等電點聚焦膠(IPG strip)，而非第二維。第二維SDS-PAGE是均一或梯度膠但無pH梯度，此為層級對調陷阱。
二維電泳兩維對照
| 維度 | 技術 | 分離依據 | 關鍵試劑 |
|---|
| 第一維 | 等電點聚焦 IEF | 等電點 (pI) | pH 梯度 (IPG strip) |
| 第二維 | SDS-PAGE | 分子量大小 | SDS (均勻負電) |
本題核心陷阱是把第一維與第二維的功能對調。A把SDS-PAGE誤植到第一維、D把pH梯度誤植到第二維。正確順序：先IEF(pI)→後SDS-PAGE(分子量)。考前牢記兩維分工別搞反。 
