專技高考-醫事檢驗師生物化學與臨床生化學107 年第 12 題單選題
利用280 nm吸光特性定量血中蛋白質含量,下列何者對測量準確度影響最小?
A游離tryptophan
B游離tyrosine
Cglucose正確答案
Dbilirubin
C正確答案
280nm吸光度測蛋白質是靠Trp/Tyr/Phe的芳香環吸收,glucose無芳香環不吸收280nm,干擾最小。
為什麼答案是 C
葡萄糖(glucose)是單醣,化學結構為多羥基醛(aldehyde),完全不含芳香環或共軛雙鍵系統,在280nm幾乎無吸光值。因此血中glucose濃度高低對280nm蛋白質定量準確度影響最小,為本題正解。
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完整詳解
Pro · 無限重點 280nm吸光度測蛋白質是靠Trp/Tyr/Phe的芳香環吸收,glucose無芳香環不吸收280nm,干擾最小。
記住280nm吸收靠芳香族胺基酸(Trp最強、Tyr次之),bilirubin也在此波段有吸收,glucose完全無芳香結構→干擾最小選C。
逐選項分析
A✕ 陷阱
色胺酸(Tryptophan)含吲哚環(indole ring),是芳香族胺基酸中280nm莫耳消光係數最高者(約5500 M⁻¹cm⁻¹)。游離Trp若存在於樣本中,會直接貢獻280nm吸光值,高估蛋白質含量,對準確度影響很大。
B✕
酪胺酸(Tyrosine)含苯酚環,亦為芳香族胺基酸,在280nm有明顯吸收(約1490 M⁻¹cm⁻¹)。游離Tyr存在會干擾蛋白質定量,影響準確度,雖不如Trp強烈,但仍是顯著干擾來源。
C✓ 正確
葡萄糖(glucose)是單醣,化學結構為多羥基醛(aldehyde),完全不含芳香環或共軛雙鍵系統,在280nm幾乎無吸光值。因此血中glucose濃度高低對280nm蛋白質定量準確度影響最小,為本題正解。
D✕ 陷阱
膽紅素(bilirubin)是線性四吡咯化合物(tetrapyrrole),具高度共軛雙鍵,吸收峰在450nm附近,但在280nm附近仍有相當吸光,高膽紅素血症患者的血清樣本會干擾280nm蛋白質定量,是臨床常見干擾因子。
280nm蛋白質定量常見干擾物比較
| 物質 | 結構特點 | 280nm吸收 | 對定量影響 |
|---|
| Tryptophan(游離) | 吲哚環(indole) | 強(ε≈5500) | 高估蛋白質,干擾大 |
| Tyrosine(游離) | 苯酚環(phenol) | 中(ε≈1490) | 高估蛋白質,干擾中 |
| Bilirubin | 共軛四吡咯 | 有(旁吸收) | 干擾明顯,臨床需注意 |
| Glucose | 多羥基醛,無芳香環 | 幾乎無 | 影響最小 ✓ |
考生常誤選D(bilirubin),因為直覺上bilirubin是黃色的吸可見光(450nm),覺得和280nm「不相關」。但bilirubin的共軛系統吸光範圍寬,確實在280nm有旁吸收,是臨床實驗室公認干擾因子。glucose才是完全無紫外光吸收結構的選項,是正解。