專技高考-醫事檢驗師生物化學與臨床生化學107 年第 32 題單選題
下列何種受質可以經由鹼性磷酯酶水解作用產生螢光?
Aadamantyl 1,2-dioxetane aryl phosphate
Bumbelliferone phosphate正確答案
Cp-nitrophenyl phosphate
Dcreatine phosphate
B正確答案
鹼性磷酸酶水解 umbelliferone phosphate 去磷酸後產生 umbelliferone(7-羥基香豆素),具強螢光,常用於螢光酵素分析。
為什麼答案是 B
umbelliferone phosphate(4-MUP 類)被鹼性磷酸酶去磷酸後,產生 umbelliferone(7-羥基香豆素),在紫外光激發下發出藍色螢光,為典型的螢光酵素受質。
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完整詳解
Pro · 無限重點 鹼性磷酸酶水解 umbelliferone phosphate 去磷酸後產生 umbelliferone(7-羥基香豆素),具強螢光,常用於螢光酵素分析。
看「螢光」抓 umbelliferone(香豆素類),看「化學發光」才選 dioxetane。
逐選項分析
A✕ 陷阱
adamantyl 1,2-dioxetane aryl phosphate(如 AMPPD/CSPD)經鹼性磷酸酶水解後產生的是『化學發光』(chemiluminescence)而非螢光,兩者機制不同,易混淆。
B✓ 正確
umbelliferone phosphate(4-MUP 類)被鹼性磷酸酶去磷酸後,產生 umbelliferone(7-羥基香豆素),在紫外光激發下發出藍色螢光,為典型的螢光酵素受質。
C✕ 陷阱
p-nitrophenyl phosphate(pNPP)水解後產生 p-nitrophenol 呈黃色,是『比色法』測鹼性磷酸酶活性的標準受質,產物為呈色不是螢光。
D✕
creatine phosphate(磷酸肌酸)是能量代謝中的高能磷酸化合物,由肌酸激酶作用,與鹼性磷酸酶及螢光偵測無關。
鹼性磷酸酶常用受質與偵測方式
| 受質 | 產物 | 偵測方式 |
|---|
| umbelliferone phosphate (4-MUP) | umbelliferone | 螢光 |
| adamantyl dioxetane phosphate | 去穩定態 dioxetane | 化學發光 |
| p-nitrophenyl phosphate | p-nitrophenol | 比色 (405nm) |
本題核心在區分『螢光』與『化學發光』。A 選項 dioxetane 受質常被誤選,但它產生的是化學發光(自體發光不需激發光源);C 選項 pNPP 是比色法產物。只有 umbelliferone 是真正的螢光產物。