專技高考-醫事檢驗師生物化學與臨床生化學108 年第 49 題單選題
以Nitrophenyl phosphate為受質測定Alkaline phosphatase（ALP）活性時，若試劑加入Amino alcohol，如Diethanol amine（DEA），可促進反應之進行，其原理為下列何者？
AAmino alcohol可作為Phosphate-accepting buffer正確答案
BAmino alcohol可促進ALP與Nitrophenyl phosphate之親和力
CAmino alcohol可抑制Phosphate從受質脫離
DAmino alcohol可提昇Nitrophenyl phosphate之溶解度
A正確答案
DEA 屬胺基醇類緩衝液，可作為磷酸接受者，促進 ALP 催化的轉磷酸反應，加速反應進行。
為什麼答案是 A
DEA 上的羥基 (-OH) 可作為磷酸接受者，將受質上的磷酸基轉移過來形成 phosphorylated DEA，使反應從單純水解變成轉磷酸反應，平衡向產物端推進，大幅提升 p-nitrophenol 生成速率。
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完整詳解
Pro · 無限重點 DEA 屬胺基醇類緩衝液，可作為磷酸接受者，促進 ALP 催化的轉磷酸反應，加速反應進行。
看到「Amino alcohol + ALP」就想「磷酸接受者 (phosphate acceptor)」，這是 IFCC 推薦 ALP 測定法的核心原理。
逐選項分析
A✓ 正確
DEA 上的羥基 (-OH) 可作為磷酸接受者，將受質上的磷酸基轉移過來形成 phosphorylated DEA，使反應從單純水解變成轉磷酸反應，平衡向產物端推進，大幅提升 p-nitrophenol 生成速率。
B✕ 陷阱
DEA 的作用機制不在於改變酶與受質的親和力 (Km)，而是作為第二受質 (磷酸接受者)，加速磷酸基轉移。混淆「促進反應」與「提高親和力」是常見陷阱。
C✕
正好相反，DEA 是「促進」磷酸從受質脫離並接受該磷酸基，而非抑制。若抑制磷酸脫離，反應反而會變慢，與題意矛盾。
D✕
p-Nitrophenyl phosphate 本身水溶性良好，不需額外助溶。DEA 的功能不是溶解度問題，而是參與磷酸轉移反應。
ALP 活性測定常用緩衝液比較
| 緩衝液 | 角色 | 反應類型 | 活性表現 |
|---|
| Carbonate buffer | 僅維持 pH | 水解反應 | 活性較低 |
| DEA (Diethanolamine) | 磷酸接受者 + 緩衝 | 轉磷酸反應 | 活性高 (IFCC 推薦) |
| AMP (2-amino-2-methyl-1-propanol) | 磷酸接受者 + 緩衝 | 轉磷酸反應 | 活性更高 (Scandinavian 法) |
考生易誤選 B「提升親和力」或 C「抑制磷酸脫離」。重點在於 DEA 是「第二受質」角色——它接受磷酸基，把反應從水解變成轉磷酸，並移除產物 Pi 的抑制，並非作用在酶與受質的結合力上。 
