專技高考-醫事檢驗師生物化學與臨床生化學108 年第 31 題單選題
以雙縮脲法（Biuret method）測定蛋白質時，所產生的產物顏色為：
D正確答案
雙縮脲法測蛋白質：銅離子與胜肽鍵結合呈紫色，吸光值 540-560 nm。
為什麼答案是 D
正解。鹼性條件下，Cu²⁺ 與蛋白質中至少含 2 個胜肽鍵的結構形成紫色錯合物，吸光波長 540-560 nm，顏色深淺與蛋白質濃度成正比。
載入中…
完整詳解
Pro · 無限重點 雙縮脲法測蛋白質：銅離子與胜肽鍵結合呈紫色，吸光值 540-560 nm。
口訣：『雙縮脲變紫』Biuret = Purple，記住銅離子+胜肽鍵=紫色錯不了。
逐選項分析
A✕ 陷阱
紅色是縮二脲變化型（如 BCA 法）或某些其他蛋白質定量法的呈色，不是經典 Biuret 法。注意別跟 BCA 法混淆。
B✕
黃色多為 Bradford 法失敗或 Folin 反應前期色澤；雙縮脲法不會停在黃色階段。
C✕
綠色不是雙縮脲反應產物。Cu²⁺ 原本溶液為淡藍色，與蛋白質胜肽鍵結合後形成 Cu²⁺-蛋白質錯合物呈紫色。
D✓ 正確
正解。鹼性條件下，Cu²⁺ 與蛋白質中至少含 2 個胜肽鍵的結構形成紫色錯合物，吸光波長 540-560 nm，顏色深淺與蛋白質濃度成正比。
常見蛋白質定量法呈色比較
| 方法 | 原理 | 呈色 | 吸光波長 |
|---|
| Biuret 雙縮脲法 | Cu²⁺ + 胜肽鍵 | 紫色 | 540-560 nm |
| BCA 法 | Cu⁺ + BCA | 紫紅色 | 562 nm |
| Lowry 法 | Biuret + Folin | 藍色 | 750 nm |
| Bradford 法 | CBB G-250 染料 | 藍色 | 595 nm |
考生常把 Biuret 法和 BCA 法的顏色搞混。雖然兩者都用銅離子，但 Biuret 是 Cu²⁺ 直接與胜肽鍵形成紫色錯合物；BCA 則需先把 Cu²⁺ 還原為 Cu⁺ 再與 BCA 試劑形成紫紅色。 
