專技高考-醫事檢驗師生物化學與臨床生化學108 年第 46 題單選題
下列有關以電泳法來分析血清中肌酸激酶(CK)同功酶的敘述,何者正確?
A檢體需室溫保存,不可冷藏或冷凍
B在pH 8.6之電泳條件下,CK-3向陽極移動之速度最快
C電泳結束,加入反應試劑後,可以可見光或螢光進行偵測正確答案
D電泳結束後,與電泳膠反應之試劑含有NADH和乳酸脫氫酶
C正確答案
CK 同功酶電泳:CK-1(BB)跑最快,反應產生 NADPH 可用螢光或紫外光偵測。
為什麼答案是 C
正確。CK 催化反應產生 ATP,經偶聯反應最終生成 NADPH,NADPH 在 340 nm 紫外光下可被偵測(吸光),亦可激發產生螢光,故可見光(顯色反應)或螢光偵測皆可。
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完整詳解
Pro · 無限重點 CK 同功酶電泳:CK-1(BB)跑最快,反應產生 NADPH 可用螢光或紫外光偵測。
記住口訣:CK 同功酶電泳偵測靠『NADPH 螢光』,往陽極跑最快的是 CK-1(BB)不是 CK-3(MM)。
逐選項分析
A✕
錯誤。CK 活性對溫度敏感且不穩定,檢體應冷藏(4°C)或冷凍保存以保留酵素活性,室溫反而會使活性快速下降,影響定量結果。
B✕ 陷阱
錯誤。在 pH 8.6 電泳條件下,CK-1(BB 型)帶負電最強、向陽極移動最快,CK-2(MB)次之,CK-3(MM)最慢甚至接近原點。CK-3 移動最快是經典陷阱。
C✓ 正確
正確。CK 催化反應產生 ATP,經偶聯反應最終生成 NADPH,NADPH 在 340 nm 紫外光下可被偵測(吸光),亦可激發產生螢光,故可見光(顯色反應)或螢光偵測皆可。
D✕ 陷阱
錯誤。反應試劑含 creatine phosphate、ADP、glucose、hexokinase、G6PD 及 NADP⁺,最終產生 NADPH 而非 NADH;偶聯酵素是 hexokinase 與 G6PD,不是乳酸脫氫酶(LDH 是用於 LDH 測定)。
CK 同功酶電泳特性
| 同功酶 | 次單元 | 主要分布 | 電泳位置(pH 8.6) |
|---|
| CK-1 | BB | 腦、平滑肌 | 陽極端最快 |
| CK-2 | MB | 心肌 | 中間 |
| CK-3 | MM | 骨骼肌 | 靠近原點最慢 |
CK 同功酶電泳有個反直覺的順序:分子量最小的 CK-1(BB) 反而跑最快,因為電泳速度看的是電荷密度而非分子量。命題者最愛拿 CK-3(MM) 來混淆,讓考生以為肌肉型會跑最快。另一個高頻陷阱是偵測系統的酵素偶聯反應:CK 反應後續接的是 G6PD 產生 NADPH,可用螢光或 340nm 紫外光偵測;很多人會跟 LDH 系統的 NADH 搞混,兩者都是脫氫酶但受質跟輔酶完全不同。記住「CK 配 G6PD 產 NADPH,LDH 配自己產 NADH」就能快速排除。