專技高考-醫事檢驗師生物化學與臨床生化學111 年第 3 題單選題
親水性作用液相層析法(hydrophilic interaction liquid chromatography, HILIC)屬於下列那一類的層析法?
Apartition chromatography正確答案
Bion-exchange chromatography
Cgel filtration chromatography
Daffinity chromatography
A正確答案
HILIC(親水性作用液相層析)主要利用分析物在固定相表面的水層與流動相之間的「分配作用」來分離極性物質,故屬於分配層析(Partition chromatography)。
為什麼答案是 A
HILIC 的分離機制主要是分析物在極性固定相表面形成的「富水層」與「流動相(富有機溶劑)」之間的分配作用(Partition)。極性越強的物質越容易分配到水層,滯留時間越長。
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完整詳解
Pro · 無限重點 HILIC(親水性作用液相層析)主要利用分析物在固定相表面的水層與流動相之間的「分配作用」來分離極性物質,故屬於分配層析(Partition chromatography)。
看到 HILIC(親水性作用),聯想極性物質在固定相水膜與有機流動相間的「分配(Partition)」,秒選 A。
逐選項分析
A✓ 正確
HILIC 的分離機制主要是分析物在極性固定相表面形成的「富水層」與「流動相(富有機溶劑)」之間的分配作用(Partition)。極性越強的物質越容易分配到水層,滯留時間越長。
B✕ 陷阱
離子交換層析(Ion-exchange)是利用帶電固定相與帶相反電荷的分析物之間的靜電吸引力進行分離。雖然 HILIC 可能帶有微弱離子作用,但其核心分類屬於分配層析。
C✕
膠體過濾層析(Gel filtration,又稱尺寸排除層析)是利用多孔性膠體,純粹依據分子大小進行分離,大分子無法進入孔洞會先流出,與 HILIC 機制完全不同。
D✕
親和層析(Affinity)是利用生物分子間高度專一性的結合作用(如抗原與抗體、酵素與受質)來分離,屬於專一性極高的層析法。
常見層析法原理比較
| 層析法 | 英文 | 分離原理 | 適用對象 |
|---|
| 分配層析 (HILIC屬之) | Partition | 物質在兩相間的溶解度/分配係數差異 | 極性/親水性小分子 |
| 離子交換層析 | Ion-exchange | 靜電引力 (電荷差異) | 帶電離子、蛋白質 |
| 膠體過濾層析 | Gel filtration | 分子大小 (立體阻礙) | 蛋白質純化、去鹽 |
| 親和層析 | Affinity | 專一性生物親和力 | 特定目標蛋白質/分子 |
考生容易因為 HILIC 名稱中有「親水性作用」,誤以為是親和層析 (Affinity) 或離子交換。必須牢記 HILIC 的本質是正相層析的一種變體,其核心物理化學機制是「分配(Partition)」。