專技高考-醫事檢驗師生物化學與臨床生化學111 年第 6 題單選題
下圖所示為測試聚合酶鏈鎖反應(PCR)中最佳黏合(annealing)溫度之電泳分析,1至10代表不同的黏合溫度,箭號代表預期 PCR產物正確大小位置,下列敘述何者較符合由 1至10 溫度變化的順序?
A由高溫至低溫
B由低溫至高溫正確答案
C先低溫至高溫再低溫
D先高溫至低溫再高溫
B正確答案
PCR退火溫度梯度電泳:溫度由低到高時,非特異性條帶消失、特異性產物先增強後減弱,圖中1→10符合低溫至高溫的趨勢。
逐選項解析
A由高溫至低溫✕ 易錯陷阱
若由高溫至低溫,預期應是左側先出現單一明亮特異性條帶,再向右出現越來越多雜帶。但圖中1-4欄位出現大量多條帶(非特異性產物),與高溫應有高特異性的預期相反,故A錯誤。
C先低溫至高溫再低溫✕ 錯誤
先低溫至高溫再低溫,表示兩端應有非特異性條帶,中間有特異性條帶。但圖中右側Lane 8-10條帶幾乎消失而非出現雜帶,不符合再次低溫的樣式。
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