專技高考-醫師(一)醫學(一)(包括生物化學、解剖學、胚胎及發育生物學、組織學、生理學等科目知識及其臨床之應用)107 年第 76 題單選題
以凝膠電泳法(gel electrophoresis)分離蛋白質時,加入 SDS (sodium dodecyl sulfate)的目的為何?
A用以決定一個蛋白質的等電點(isoelectric point)
B用以決定一個蛋白質的特異活性(specific activity)
C用以保護蛋白質的生物結構和活性
D用以決定蛋白質分子量正確答案
D正確答案
SDS-PAGE 中 SDS 使蛋白質變性並均一帶負電,讓遷移速率只依分子量決定。
為什麼答案是 D
SDS 以固定比例 (約 1.4g/g) 結合蛋白質,使其帶均一負電並呈線性構形,遷移速率只與分子大小有關,故可依標準曲線推算分子量。
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完整詳解
Pro · 無限重點 SDS-PAGE 中 SDS 使蛋白質變性並均一帶負電,讓遷移速率只依分子量決定。
看到 SDS-PAGE 直接想「測分子量」,這是生化實驗的招牌搭配。
逐選項分析
A✕
測等電點要用等電聚焦電泳 (IEF),利用 pH 梯度讓蛋白質停在淨電荷為零處,與 SDS 無關。SDS 反而會破壞原本電荷。
B✕
特異活性 = 酵素活性/總蛋白量,需用酵素活性分析與蛋白質定量求得,非電泳能測。且 SDS 會使蛋白變性失活。
C✕ 陷阱
完全相反!SDS 是強陰離子界面活性劑,會破壞非共價鍵、使蛋白質去摺疊並失去活性。要保留活性應用 native PAGE。
D✓ 正確
SDS 以固定比例 (約 1.4g/g) 結合蛋白質,使其帶均一負電並呈線性構形,遷移速率只與分子大小有關,故可依標準曲線推算分子量。
常見蛋白質電泳法比較
| 方法 | 條件 | 分離依據 | 用途 |
|---|
| SDS-PAGE | 加 SDS 變性 | 分子量 | 測 MW |
| Native PAGE | 不變性 | 大小+電荷+形狀 | 保留活性 |
| IEF 等電聚焦 | pH 梯度 | 等電點 (pI) | 測 pI |
| 2D 電泳 | IEF + SDS-PAGE | pI + MW | 蛋白質體學 |
C 選項是最大陷阱!SDS 的作用恰好是「破壞」而非「保護」蛋白質結構。許多考生看到「保護」直覺是好事就選它,但 SDS 作為變性劑會使蛋白質失活,要保留活性必須用 native 條件。
醫學(一)(包括生物化學、解剖學、胚胎及發育生物學、組織學、生理學等科目知識及其臨床之應用) 相關題目