專技高考-醫事檢驗師微生物學與臨床微生物學（包括細菌與黴菌）110 年第 4 題單選題
關於Gram stain的敘述，下列何者最適宜？
A是一種differential stain正確答案
Bcrystal violet是mordant
Csafranin當primary stain
Dacid alcohol當作decolorizer
A正確答案
革蘭氏染色屬於鑑別染色(differential stain)，能區分Gram陽性與陰性菌。
為什麼答案是 A
Gram stain是典型的differential stain(鑑別染色)，利用細胞壁構造差異將細菌分為Gram陽性(紫色)與Gram陰性(紅色)兩大類，是最常用的細菌鑑別染色法。敘述正確。
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完整詳解
Pro · 無限重點 革蘭氏染色屬於鑑別染色(differential stain)，能區分Gram陽性與陰性菌。
記住染色順序：Crystal violet(primary)→Iodine(mordant)→Alcohol/Acetone(decolorizer)→Safranin(counterstain)。
逐選項分析
A✓ 正確
Gram stain是典型的differential stain(鑑別染色)，利用細胞壁構造差異將細菌分為Gram陽性(紫色)與Gram陰性(紅色)兩大類，是最常用的細菌鑑別染色法。敘述正確。
B✕ 陷阱
Crystal violet(結晶紫)是primary stain(初染劑)，並非mordant。真正的mordant(媒染劑)是Gram's iodine(碘液)，作用是與crystal violet形成複合物以增強染色固定。名詞偷換。
C✕ 陷阱
Safranin(番紅)是counterstain(複染劑/對比染劑)，用於使脫色後的Gram陰性菌呈現紅色。primary stain應為crystal violet，角色顛倒，錯誤。
D✕ 陷阱
Gram stain的脫色劑(decolorizer)為95%酒精或丙酮，並非acid alcohol。acid alcohol(酸性酒精)是抗酸性染色(Ziehl-Neelsen, acid-fast stain)所用的脫色劑，兩者混淆。
革蘭氏染色四步驟試劑
| 步驟 | 試劑 | 角色 | 備註 |
|---|
| 1. 初染 | Crystal violet | Primary stain | 所有菌染成紫色 |
| 2. 媒染 | Gram's iodine | Mordant | 形成CV-I複合物 |
| 3. 脫色 | 酒精/丙酮 | Decolorizer | 關鍵鑑別步驟 |
| 4. 複染 | Safranin | Counterstain | 陰性菌染紅色 |
本題B、C、D皆把革蘭氏染色的試劑角色互換，或把抗酸性染色的脫色劑(acid alcohol)混入。考生需牢記四步驟試劑名稱與對應角色：Crystal violet初染、Iodine媒染、Alcohol脫色、Safranin複染，並區分acid alcohol屬於抗酸染色。
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