專技高考-醫師(一)醫學(一)(包括生物化學、解剖學、胚胎及發育生物學、組織學、生理學等科目知識及其臨床之應用)112 年第 100 題單選題
以限制性片段長度多態性(restrictionfragmentlengthpolymorphisms,RFLPs)來進行去氧核糖核酸指紋鑑定(DNAfingerprinting)時,通常需要結合下列何種生物技術?
A西方墨點法(Westernblotting)
B南方墨點法(Southernblotting)正確答案
C北方墨點法(Northernblotting)
D長條墨點法(slotblotting)
B正確答案
RFLP 分析的是 DNA 片段長度差異,偵測 DNA 必用 Southern blotting。
為什麼答案是 B
Southern blotting 專門偵測「DNA」片段。RFLP 以限制酶切割 DNA 後,用電泳分離片段,再以 Southern blot 配合放射性探針顯影,才能判讀片段長度差異。
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完整詳解
Pro · 無限重點 RFLP 分析的是 DNA 片段長度差異,偵測 DNA 必用 Southern blotting。
口訣:SNOW DROP → Southern=DNA, Northern=RNA, Western=Protein。RFLP 處理 DNA,選 Southern。
逐選項分析
A✕
Western blotting 是偵測「蛋白質」的技術,使用抗體作為探針。RFLP 是分析 DNA 序列多態性,與蛋白質無關,故不適用。
B✓ 正確
Southern blotting 專門偵測「DNA」片段。RFLP 以限制酶切割 DNA 後,用電泳分離片段,再以 Southern blot 配合放射性探針顯影,才能判讀片段長度差異。
C✕ 陷阱
Northern blotting 偵測的是「RNA」,常用於分析基因表現量。RFLP 處理的是基因體 DNA,不是 RNA,容易與 Southern 混淆但方向完全不同。
D✕
Slot blotting(或 dot blot)是將核酸直接點到膜上,不經電泳分離,無法解析片段長度。RFLP 必須看「長度差異」,因此需電泳+Southern,非 slot blot。
四大 Blotting 技術對照
| 技術 | 偵測標的 | 探針 | 臨床/研究應用 |
|---|
| Southern blot | DNA | DNA 探針 | RFLP、基因定位、DNA 指紋 |
| Northern blot | RNA | DNA/RNA 探針 | 基因表現量分析 |
| Western blot | 蛋白質 | 抗體 | HIV 確認、蛋白表現 |
| Slot/Dot blot | DNA/RNA/蛋白 | 對應探針 | 快速定量,無長度分離 |
Blotting 技術的核心判斷是「偵測什麼分子」:Southern 偵測 DNA、Northern 偵測 RNA、Western 偵測蛋白質。RFLP(限制片段長度多型性)本質是把基因組 DNA 切成不同長度片段後比對差異,全程都在處理 DNA 分子,因此必定使用 Southern blotting。考生容易因為「RFLP 可用於基因表現分析」就誤選 Northern,但那是檢測 RNA 轉錄本的場合;只要看到「片段長度」「限制酶切割」「基因型鑑定」等關鍵字,就該直覺反應是 DNA 層次的操作。記住 Southern 是四種 blotting 中唯一處理 DNA 的技術,其他都是後來衍生命名。
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