專技高考-醫師(一)醫學（一）（包括生物化學、解剖學、胚胎及發育生物學、組織學、生理學等科目知識及其臨床之應用）114 年第 98 題單選題考點：α 用於內部標記考點：β 不被轉移

如果想要將一特定基因的單股多聚核苷酸（polynucleotide）製作成偵測此特定基因的探針（probe），通常會利用多聚核苷酸激酶（polynucleotide kinase）在其 5'端標記具有放射性的 32P，進行該反應時，需加入下列何種 32P-dATP 材料來進行標記？

Aα-32P-dATP

Bβ-32P-dATP

Cγ-32P-dATP正確答案

DATP

答案與詳解

正確答案

多聚核苷酸激酶將 ATP 的 γ 磷酸轉移至 DNA 5'-OH 端，故需用 γ-32P-dATP（註：題幹與選項之 dATP 實為 ATP 之筆誤，PNK 實際受質為 ATP，但依題意考點在 γ 位置）才能把放射標記帶到 5' 端。

Aα-32P-dATPα 用於內部標記✕ 易錯陷阱

α 位磷酸是直接接在核糖上的磷酸，會在 DNA 聚合時被併入鏈中（如 PCR、nick translation），但不是 PNK 5' 端標記使用的位置。

Bβ-32P-dATPβ 不被轉移✕ 錯誤

β 位是 ATP 中間的磷酸，不會被 polynucleotide kinase 轉移，實務上也幾乎不用 β-32P 標記 DNA。

Cγ-32P-dATP✓ 正確

DATP✕ 錯誤

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