專技高考-醫師(一)醫學（一）（包括生物化學、解剖學、胚胎及發育生物學、組織學、生理學等科目知識及其臨床之應用）114 年第 99 題單選題考點：複製起點必備考點：質體承載上限
在進行重組 DNA 實驗時，常需使用可接入選殖 DNA 片段的選殖質體（cloning plasmids），下列關於此選殖質體的敘述何者正確？
A在大腸桿菌內進行 DNA 複製（replication）時，此環狀質體（circular plasmids）不需要複製起點（origin of replication）
B經常可用來選殖超過 $50 \times 10^{3}$ 鹼基對（base pairs）的外來 DNA 片段
C通常需要具有抗生素抗藥性基因（antibiotic resistance gene）提供篩選的標記正確答案
D需要環化重組酶（Cre recombinase）協助外來 DNA 片段插入
C正確答案
選殖質體必備三要素：複製起點、篩選標記（抗生素抗藥性基因）、多重選殖位點(MCS)。
逐選項解析
A在大腸桿菌內進行 DNA 複製（replication）時，此環狀質體（circular plasmids）不需要複製起點（origin of replication）複製起點必備✕ 錯誤
錯誤。任何質體要在宿主（如大腸桿菌）內複製，都必須有複製起點（ori），否則無法自我複製並傳給子代細胞，是質體三大必備元件之一。
B經常可用來選殖超過 $50 \times 10^{3}$ 鹼基對（base pairs）的外來 DNA 片段質體承載上限✕ 易錯陷阱
錯誤。一般選殖質體可承載的外來片段約 10 kb 以內。若要選殖 50 kb 以上大片段，需使用 cosmid（~45 kb）、BAC（~300 kb）或 YAC（~1000 kb），而非普通 plasmid。
C通常需要具有抗生素抗藥性基因（antibiotic resistance gene）提供篩選的標記✓ 正確
D需要環化重組酶（Cre recombinase）協助外來 DNA 片段插入✕ 易錯陷阱
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