專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學（包括寄生蟲學）108 年第 80 題單選題
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關於應用核酸序列的即時放大反應（Real-time nucleic acid sequence-based amplification，Real-time NASBA）檢測腦脊液中腸病毒的敘述，下列何者最不適當？
承上題，下列何者不是添加內部校正子（internal calibrator）RNA至檢體中，再進行核酸抽取及擴增的目的？
1 / 2A檢測核酸萃取是否成功
B檢測腸病毒特異性探針的專一性正確答案
C檢測核酸擴增是否成功
D輔助定量病毒核酸
B正確答案
內部校正子用於監控核酸萃取與擴增過程是否成功，並輔助定量，無法檢測目標探針的專一性。
為什麼答案是 B
探針的專一性（特異性）是透過探針序列設計與交叉反應實驗來驗證的，屬於試劑本身的特性，無法透過添加內部校正子來檢測。此為本題要選的「非目的」。
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完整詳解
Pro · 無限重點 內部校正子用於監控核酸萃取與擴增過程是否成功，並輔助定量，無法檢測目標探針的專一性。
內部校正子 = 監控「過程」（萃取、擴增、定量），不負責驗證「探針專一性」。看到「專一性/特異性」直接選。
逐選項分析
A✕
內部校正子是在萃取前加入檢體的已知核酸。若最終未檢測到其訊號，代表核酸萃取步驟失敗或檢體中含有抑制物，故為其目的之一。
B✓ 正確
探針的專一性（特異性）是透過探針序列設計與交叉反應實驗來驗證的，屬於試劑本身的特性，無法透過添加內部校正子來檢測。此為本題要選的「非目的」。
C✕
若核酸擴增過程失敗（例如 PCR 抑制物存在），內部校正子也無法被擴增而無訊號，因此可用來監控擴增步驟是否成功。
D✕
內部校正子可作為定量參考標準，或用於校正不同檢體間的核酸萃取效率差異，從而輔助目標病毒核酸的精確定量。
內部校正子 (Internal Calibrator/Control) 功能
| 功能 | 說明 | 結果判讀 |
|---|
| 監控萃取 | 確認核酸是否成功從檢體中抽出 | 無訊號 = 萃取失敗 |
| 監控擴增 | 確認 PCR 過程無抑制物干擾 | 無訊號 = 擴增失敗/有抑制物 |
| 輔助定量 | 校正萃取效率差異，作為定量參考 | 提高定量準確度 |
| 驗證專一性 | 探針設計與交叉反應測試 (非內部校正子功能) | 不適用 |
考選部愛混淆「過程監控」與「試劑特性驗證」。內部校正子是用來確保「這個檢體的處理過程」沒問題，而不是用來驗證「這個探針」會不會抓錯目標。探針專一性是試劑出廠前就驗證好的。
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