聚合酶鏈鎖反應（polymerase chain reaction, PCR），包含三個步驟，分別為：加熱分離 DNA 雙股；DNA 引子與模板 DNA 特定位置結合；以耐高溫 Taq 聚合酶合成新股 DNA。下列何者是每個步驟大約對應的溫度範圍？
A50℃～60℃；90℃～95℃；72℃
B50℃～60℃；90℃～95℃；37℃
C90℃～95℃；50℃～60℃；72℃正確答案
D90℃～95℃；50℃～60℃；37℃
答案與詳解
C
正確答案
PCR溫度：90-95℃變性解雙股、50-60℃退火接引子、72℃延伸合成。記住高溫、中溫、最適溫。
為什麼答案是 C
完全正確。90-95℃變性、50-60℃退火、72℃延伸，符合PCR標準流程。
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完整詳解
Pro · 無限重點 PCR溫度：90-95℃變性解雙股、50-60℃退火接引子、72℃延伸合成。記住高溫、中溫、最適溫。
秒殺技巧
第一步必為高溫(90℃以上)解開DNA雙股，直接排除A、B；Taq聚合酶最適溫為72℃，排除37℃的D，秒選C。逐選項分析
A✕ 陷阱
溫度順序完全顛倒，第一步未達高溫無法使DNA變性分離雙股。
B✕
溫度順序錯誤，且延伸步驟37℃不符合Taq聚合酶的最適作用溫度。
C✓ 正確
完全正確。90-95℃變性、50-60℃退火、72℃延伸，符合PCR標準流程。
D✕ 陷阱
前兩步溫度正確，但延伸步驟37℃錯誤，Taq聚合酶的最適溫度為72℃。
PCR 三步驟與溫度對照表
| 步驟 | 英文名稱 | 溫度範圍 | 主要作用 |
|---|---|---|---|
| 1. 變性 | Denaturation | 90℃～95℃ | 高溫破壞氫鍵，使DNA雙股分離 |
| 2. 退火 | Annealing | 50℃～60℃ | 降溫讓引子與模板DNA特定位置結合 |
| 3. 延伸 | Extension | 72℃左右 | Taq聚合酶最適溫，由引子開始合成新股 |
陷阱提醒
題目可能將一般DNA聚合酶的最適溫度(37℃)與耐高溫Taq聚合酶的最適溫度(72℃)混淆。記住PCR專屬的Taq酶來自嗜熱菌，必須在72℃才能發揮最大活性。