專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)108 年第 46 題單選題
單股結構多型性(Single-strand conformation polymorphism, SSCP)需要進行下列何種電泳?
A非變性聚丙烯醯胺凝膠電泳(Non-denatured PAGE)正確答案
B變性聚丙烯醯胺凝膠電泳(Denatured PAGE)
C非變性瓊脂膠體電泳(Non-denatured agarose gel electrophoresis)
D變性瓊脂膠體電泳(Denatured agarose gel electrophoresis)
A正確答案
SSCP 利用單股 DNA 在非變性條件下因序列差異折疊成不同二級結構,產生電泳遷移率差異,故須用非變性 PAGE。
逐選項解析
A非變性聚丙烯醯胺凝膠電泳(Non-denatured PAGE)SSCP 標準操作✓ 正確
正解。SSCP 先將 DNA 變性成單股後,於非變性 PAGE 中跑膠,使單股自行折疊成立體構型。單一鹼基差異就會造成構型不同、遷移率改變,常用於偵測點突變。
B變性聚丙烯醯胺凝膠電泳(Denatured PAGE)變性破壞構型✕ 易錯陷阱
錯誤。若使用變性 PAGE,單股 DNA 會被拉直無法形成二級結構,遷移率僅取決於分子量,無法區分序列差異,SSCP 失去意義。
C非變性瓊脂膠體電泳(Non-denatured agarose gel electrophoresis)✕ 錯誤
D變性瓊脂膠體電泳(Denatured agarose gel electrophoresis)✕ 錯誤
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