專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學（包括寄生蟲學）108 年第 63 題單選題
使用reverse dot blot SSOP（Sequence-specific oligonucleotide probe）的方法做HLA分型，下列何者被固定在膜上？
A探針（Probe）正確答案
BPCR擴增產物
C引子（Primer）
D合成的HLA分子（Recombinant HLA）
A正確答案
Reverse dot blot 的「reverse」就是反過來：把探針固定在膜上，標記過的 PCR 產物去雜交。
為什麼答案是 A
正解。Reverse dot blot SSOP 的核心特色就是把多種序列特異性探針（SSOP）預先固定在膜上（如 strip），再用標記過的 PCR 產物去雜交，一次可分析多個 HLA 等位基因。
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完整詳解
Pro · 無限重點 Reverse dot blot 的「reverse」就是反過來：把探針固定在膜上，標記過的 PCR 產物去雜交。
看到「reverse」就反過來想：傳統 dot blot 固定樣本探針來測；reverse 就是固定探針、樣本（PCR 產物）來測。
逐選項分析
A✓ 正確
正解。Reverse dot blot SSOP 的核心特色就是把多種序列特異性探針（SSOP）預先固定在膜上（如 strip），再用標記過的 PCR 產物去雜交，一次可分析多個 HLA 等位基因。
B✕ 陷阱
陷阱選項。傳統 dot blot SSOP 才是把 PCR 產物固定在膜上、用標記探針去測；reverse 版本剛好相反，PCR 產物是「液相」流動端，帶著生物素等標記去與膜上探針結合。
C✕
引子是用於 PCR 擴增階段，僅用於放大目標 HLA 區段，並不會被固定在膜上。引子與探針是不同角色，不要混淆。
D✕
HLA 分型是檢測核酸層次（DNA 序列），不是蛋白質層次。重組 HLA 分子用於功能性研究或抗體檢測，與 SSOP 分子檢測無關。
HLA 分型常用分子檢測法
| 方法 | 膜上固定 | 液相端 | 特點 |
|---|
| Dot blot SSOP | PCR 產物 | 標記探針 | 傳統法，每次測一探針 |
| Reverse dot blot SSOP | 多種 SSO 探針 | 標記 PCR 產物 | 高通量，一次多位點 |
| SSP-PCR | —（用電泳） | — | 靠特異引子直接判型 |
| SBT 定序 | — | — | 解析度最高，可分高解析 |
考生常把 dot blot 和 reverse dot blot 搞混，誤選 B（PCR 產物）。記住關鍵字「reverse = 反過來」：傳統法固定樣本，reverse 法固定探針。HLA 商業化 strip（如 LiPA）大多採 reverse 設計。
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