專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)105 年第 77 題單選題
純化出的RNA樣本,保存6個月以上的適當儲存方式有那些?①-20℃ in DEPC-treated water ②-20℃ in ethanol ③-70℃ in DEPC-treated water ④-70℃ in ethanol
C正確答案
RNA 長期保存(>6個月)需在乙醇中,溫度可選 -20℃ 或 -70℃,避免 RNase 降解。
為什麼答案是 C
②-20℃ in ethanol 與 ④-70℃ in ethanol 皆正確。RNA 在乙醇(通常為 70-100% ethanol 加 NaOAc)中以沉澱形式保存,可有效抑制 RNase 活性,無論 -20℃ 或 -70℃ 都能穩定保存 6 個月以上。
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完整詳解
Pro · 無限重點 RNA 長期保存(>6個月)需在乙醇中,溫度可選 -20℃ 或 -70℃,避免 RNase 降解。
看到「長期保存 RNA」直接鎖定「乙醇沉澱保存」,DEPC water 只適合短期。
逐選項分析
A✕
①-20℃ in DEPC water 與 ②-20℃ ethanol 組合錯誤。DEPC water 中保存 RNA 不適合長期(>6個月),即使 -20℃ 仍易被殘留 RNase 降解。
B✕ 陷阱
①③皆為 DEPC water 保存,雖溫度不同但介質相同。DEPC water 僅適合短期(數週內)使用,長期儲存 RNA 容易降解,不符合 6 個月以上需求。
C✓ 正確
②-20℃ in ethanol 與 ④-70℃ in ethanol 皆正確。RNA 在乙醇(通常為 70-100% ethanol 加 NaOAc)中以沉澱形式保存,可有效抑制 RNase 活性,無論 -20℃ 或 -70℃ 都能穩定保存 6 個月以上。
D✕
③-70℃ DEPC water 雖溫度極低,但水溶液中 RNA 仍易被微量 RNase 緩慢降解;④雖正確但組合不全,不如 C 完整。
RNA 保存方式對照
| 保存介質 | 溫度 | 保存時間 | 適用情境 |
|---|
| DEPC-treated water | 4℃ | 數天 | 立即使用 |
| DEPC-treated water | -20℃ / -70℃ | 數週至數月 | 短期備用 |
| Ethanol (70-100%) + NaOAc | -20℃ | >6 個月 | 長期保存 ✓ |
| Ethanol (70-100%) + NaOAc | -70℃ | >1 年 | 最佳長期 ✓ |
| RNAlater / TRIzol | -80℃ | 數年 | 組織樣本 |
考生常以為「溫度越低越好」就選 -70℃ 系列(B 選項),但實際上「保存介質」才是長期保存的關鍵。RNA 在水溶液中即使極低溫仍會被微量 RNase 降解,唯有乙醇沉澱才能真正抑制酵素活性、達成 6 個月以上保存。
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