專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學（包括寄生蟲學）105 年第 53 題單選題
以熔解曲線分析法（Melting curve analysis）偵測single nucleotide polymorphism（SNP），下列敘述何者正確？
A變性梯度膠體電泳法或即時聚合酶連鎖反應等技術常運用於熔解曲線分析法
B當探針（Probe）與欲偵測之基因完整配對時其熔解溫度會比錯誤配對（Mismatch）熔解溫度高正確答案
C即時聚合酶連鎖反應之Ct（Threshold cycle）比熔解曲線更適合判斷是否有SNP之存在
D非探針型螢光染劑SYBR-green I進行即時聚合酶連鎖反應之熔解曲線分析無法應用在SNP偵測
B正確答案
熔解曲線分析中，探針與目標完整配對時 Tm 較高，錯配（mismatch）會使 Tm 下降，可用於 SNP 判別。
逐選項解析
A變性梯度膠體電泳法或即時聚合酶連鎖反應等技術常運用於熔解曲線分析法✕ 易錯陷阱
DGGE（變性梯度膠體電泳）是利用變性劑梯度分離不同序列 DNA，原理與熔解曲線分析無關；熔解曲線分析主要搭配 real-time PCR + 螢光染劑/探針進行，不會搭配 DGGE。
B當探針（Probe）與欲偵測之基因完整配對時其熔解溫度會比錯誤配對（Mismatch）熔解溫度高✓ 正確
C即時聚合酶連鎖反應之Ct（Threshold cycle）比熔解曲線更適合判斷是否有SNP之存在✕ 易錯陷阱
Ct 值反映的是模板起始量（量的多寡），與序列差異無關；要判斷 SNP（質的差異）必須看熔解曲線的 Tm 位移，所以是熔解曲線比 Ct 更適合判別 SNP，本選項敘述顛倒。
D非探針型螢光染劑SYBR-green I進行即時聚合酶連鎖反應之熔解曲線分析無法應用在SNP偵測✕ 易錯陷阱
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