專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學（包括寄生蟲學）105 年第 53 題單選題

以熔解曲線分析法（Melting curve analysis）偵測single nucleotide polymorphism（SNP），下列敘述何者正確？

A變性梯度膠體電泳法或即時聚合酶連鎖反應等技術常運用於熔解曲線分析法

B當探針（Probe）與欲偵測之基因完整配對時其熔解溫度會比錯誤配對（Mismatch）熔解溫度高正確答案

C即時聚合酶連鎖反應之Ct（Threshold cycle）比熔解曲線更適合判斷是否有SNP之存在

D非探針型螢光染劑SYBR-green I進行即時聚合酶連鎖反應之熔解曲線分析無法應用在SNP偵測

答案與詳解

正確答案

熔解曲線分析中，探針與目標完整配對時 Tm 較高，錯配（mismatch）會使 Tm 下降，可用於 SNP 判別。

完整配對（perfect match）的雙股 DNA 氫鍵完整、最穩定，需較高溫度才能解離，故 Tm 較高；單鹼基錯配（mismatch）會破壞局部氫鍵，雙股較不穩，Tm 下降，這正是用熔解曲線判別 SNP 的核心原理。

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